Efeitos da liraglutida em modelo experimental de hepatotoxicidade aguda

Orientadora: Profª. Drª. Alexandra AccoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 25/02/2019Inclui referências: p. 62-67Resumo: A doença hepática aguda é um problema de saúde global que se desenvolve quando ocorre exposição abusiva a uma droga ou agente químico. O tratamento efetivo dos casos de hepatotoxicidade ainda é limitado e estudos envolvendo novas possibilidades terapêuticas são necessários. A liraglutida, um análogo do peptídeo semelhante ao glucagon (GLP-1), demonstrou reduzir o acúmulo de gordura e o estresse oxidativo em doenças hepáticas crônicas. Assim, este estudo objetivou investigar o potencial hepatoprotetor e terapêutico da liraglutida frente a um modelo de hepatotoxicidade induzida por tetracloreto de carbono (CCl4). Camundongos Swiss machos foram submetidos a dois protocolos: 1) Pré-tratamento (efeito hepatoprotetor): consistiu no tratamento intraperitoneal prévio com liraglutida (0,057 ou 0,118 mg/kg) ou veículo (água destilada), uma vez ao dia, durante 7 dias consecutivos, e nos dias 6 e 7 de tratamento os animais foram desafiados com CCl4 a 2% (i.p.; 5 mL/kg); 2) Tratamento tardio (efeito terapêutico): iniciou com o desafio por CCl4 a 5% (i.p.; 5 mL/kg) seguido do tratamento com liraglutida (0,057 mg/kg) ou veículo por apenas 1 dia. As doses de liraglutida foram calculadas por alometria interespecífica utilizando as doses indicadas para humanos, 0,6 e 1,2 mg/kg, respectivamente. Em ambos os protocolos, anestesia seguida de eutanásia foi realizada 24 horas após o último tratamento, e amostras de sangue, bile e fígado foram coletadas. Biomarcadores de lesão hepática, estresse oxidativo, metabolismo e histologia foram investigados. Além disso, foi realizado um ensaio in vitro para avaliar a atividade sequestrante da liraglutida per se utilizando o radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH). Ambos os protocolos de tratamento com liraglutida atenuaram a hepatotoxicidade do CCl4, demonstrando seu potencial protetor e curativo, respectivamente. Esses efeitos podem ser atribuídos à preservação do sistema antioxidante celular, uma vez que foram observados níveis aumentados de GSH e da atividade da SOD, e redução na peroxidação lipídica no fígado. A liraglutida também manteve os níveis de glicogênio hepático, indicando preservar o metabolismo frente à lesão. In vitro, o análogo de GLP-1 exibiu moderada atividade sequestradora de radicais livres. Tais resultados demonstram o potencial hepatoprotetor e terapêutico da liraglutida, que pode ser atribuído à redução do estresse oxidativo e suporte do metabolismo hepático. Palavras-chaves: CCl4; GLP-1; hepatotoxicidade; liraglutida; estresse oxidativo.Abstract: Acute liver disease is a current global health problem and develops when an abusive exposure to a drug or chemical agent occurs. Effective treatment for hepatotoxicity cases is limited and studies involving compounds that may promote hepatoprotective and therapeutic effects are necessary. Liraglutide, a glucagon-like peptide (GLP-1) analogue, demonstrated to reduce hepatic fat accumulation and oxidative stress in chronic liver diseases. This study aimed to investigate the hepatoprotective and therapeutic potential of liraglutide against an acute model of hepatotoxicity in mice, induced by carbon tetrachloride (CCl4). Swiss male mice were submitted to two different protocols: 1) Pretreatment (hepatoprotective effect): consisted of the previous intraperitoneal treatment with liraglutide (0.057 or 0.118 mg/kg) or vehicle (distillate water), once a day, for 7 consecutive days, and on 6th and 7th days of treatment the animals were challenged with i.p 2% CCl4 (5 mL/kg); 2) Late treatment (therapeutic effect): started with the challenge by 5% CCl4 (5 mL/kg) followed by the treatment with liraglutide (0.057 mg/kg) or vehicle for only 1 day. Liraglutide doses were calculated by interspecific allometry using the doses indicated for human beings, 0.6 and 1.2 mg/kg, respectively. In both protocols the anesthesia followed by euthanasia was performed 24 h after the last treatment, and samples of blood, liver and bile were collected. Biomarkers of liver damages, hepatic oxidative stress, metabolism and histology were investigated. In addition, an in vitro assay was performed to evaluate the scavenging activity of liraglutide per se using the free radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) test. Both treatment protocols with liraglutide attenuated the hepatotoxicity induced by CCl4, demonstrating its protective and curative potential. These effects may be attributed to the preservation of the cellular antioxidant system, since increased levels of GSH and SOD activity, and reduction of lipid peroxidation were observed. Liraglutide also preserved hepatic glycogen levels, indicating maintenance of the liver metabolism in CCl4 injury. In vitro, the GLP-1 analogue exhibited moderated radical scavenging activity. Our results demonstrated the hepatoprotective and therapeutic potential of liraglutide, which may be attributed to the reduction of oxidative stress and metabolism support. Keywords: Acute liver injury; CCl4; GLP-1; liraglutide; oxidative stress