O impacto do exercício físico nas vesículas extracelulares circulantes em murganhos intoxicados com metanfetamina

Physical exercise (PE) is essential for promoting lifelong health and well-being and preventing a variety of diseases, including central nervous system (CNS) diseases. For example, PE plays a key role in the prevention and/or treatment of substance abuse disorders, including methamphetamine (METH) misuse. METH is an addictive psychostimulant, which is sought because it produces effects such as euphoria, and increased energy. After binging or during the deprivation phase, following continuous METH exposure, METH users may experience emotional impairments, including anxiety and depression. Cells secrete extracellular vesicles (EVs) by default and in response to diverse stimuli for the purpose of cell communication and tissue homeostasis. EVs are present in all body fluids including peripheral blood. Physical activity is associated with the release of nano-sized EVs into the circulation. We argue that PE-triggered EVs in METH-intoxicated mice. In this sense, C57BL/6 mice were subjected to a PE program (five days a week for eight weeks) adapted to each animal (by exercise test) 24 hours after the administration of a single dose of METH (30 mg/kg intraperitoneal injection (i.p.)). The serum-derived EVs were evaluated by Western Blotting, transmission electron microscopy (TEM) and by nanoparticle tracking analysis (NTA). Behavioral and emotional profile of METH-intoxicated mice was also characterized. Neither PE nor METH altered behavioral parameters at the end of the protocol. However, PE triggered physiologic alterations, namely a reduction in spleen and adrenal glands mass. Furthermore, our study revealed that exercise triggers a rapid release of EVs with the characteristic size of exosomes into the circulation. Moreover, a mild trend towards a higher concentration of EVs in the serum of exercised animals was observed. Interestingly, METH seems to increase the size of the EVs. These results suggest that both chronic PE and METH intoxication may be associated with alternations in serum-derived EVs, however, further studies need to be performed in order to characterize EVs and their cargo (eg. miRNAs, proteins) upon PE and METH stimuli.O exercício físico (EF) é essencial para promover a saúde e o bem-estar ao longo da vida e prevenir uma variedade de doenças, incluindo doenças do sistema nervoso central (SNC). Por exemplo, o EF apresenta um papel fundamental na prevenção e/ou tratamento de distúrbios causados pelo abuso de substâncias, incluindo o uso indevido de metanfetamina (METH). A METH é um psicostimulante viciante, sendo procurada porque produz efeitos como euforia e aumento de energia. Durante a fase de privação após uma exposição contínua a METH, os consumidores podem experienciar diversas emoções, incluído ansiedade e depressão. As células secretam vesículas extracelulares (VEs) por padrão e em resposta a diversos estímulos para fins de comunicação celular e homeostase tecidual. As VEs estão presentes em todos os fluidos corporais, incluindo no sangue periférico. A atividade física está associada à libertação na circulação de VEs de tamanho nanométrico. Argumentamos a libertação de VEs desencadeada pelo EF em murganhos intoxicados com METH. Neste sentido, murganhos C57BL/6 foram submetidos a um programa de EF (cinco dias por semana, durante oito semanas) adaptado a cada animal (por realização do teste ergométrico), 24 horas após a administração de uma dose única de METH (30 mg/kg injeção intraperitoneal (i.p.)). As VEs derivadas do soro foram avaliadas através de Western Blotting, microscopia eletrónica de transmissão (MET) e por análise de rastreamento de nanopartículas (NTA). O perfil comportamental e emocional dos murganhos intoxicados com METH também foi caracterizado. Nem o EF nem a METH alteraram os parâmetros comportamentais no final do protocolo. No entanto, o EF desencadeou alterações fisiológicas, nomeadamente a redução da massa do baço e das glândulas adrenais. Além disso, o nosso estudo revelou que o exercício desencadeia uma rápida libertação na circulação de VEs com o tamanho característico de exossomas. Além disso, foi observada uma leve tendência de uma maior concentração de VEs no soro de animais exercitados. Curiosamente, a METH parece aumentar o tamanho das VEs. Estes resultados sugerem que o EF crónico e a intoxicação com METH podem estar associados a alterações nas VEs derivadas do soro, no entanto, precisam de ser realizados mais estudos para caracterizar as VEs e a sua carga (por exemplo, miRNAs, proteínas) sobre os estímulos do EF e da METH.Mestrado em Biologia Molecular e Celula