Validasi Metode Analisis Mangiferin dalam Plasma In Vitro Secara Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri

Mangiferin merupakan senyawa polifenol C-glikosilxanton yang umumnya terdapat pada daun dan kulit batang mangga (Mangifera Indica) dari famili Anacardiaceae. Senyawa ini memiliki aktivitas biologis sebagai antiinflamasi, antidiabetes. Konsentrasi obat dalam plasma kecil, sehingga diperlukan metode bioanalisis yang selektif, akurat dan sensitif. Metode analisis komatografi lapis tipis-densitometri (KLT Densitometri) telah dikembangkan dan divalidasi untuk analisis mangiferin dalam plasma in vitro. Mangiferin diekstraksi dari plasma dengan metode pengendapan protein menggunakan metanol melalui proses vorteks selama 5 menit dan sentrifugasi pada kecepatan 10000 rpm selama 10 menit. Analisis densitometri mangiferin dalam plasma dilakukan pada panjang gelombang 257 nm pada plat KLT silica gel 60 F254 sebagai fase diam dan metanol-asam format 1% (3:7 v/v) sebagai fase gerak. Pemisahan mangiferin menghasilkan bercak dengan Rf 0,52. Linearitas diperoleh pada rentang konsentrasi 0,1-0,5 μg/mL menunjukkan kurva kalibrasi yang linear dengan persamaan regresi y = 1025,4 +1336,5x dan koefisien korelasi (r = 0,9999). Batas deteksi dan batas kuantitasi mangiferin adalah 0,008 μg/mL dan 0,028 μg/mL. Koefisien variasi (KV) intraday dan interday tidak lebih dari ± 15% untuk konsentrasi rendah, sedang, dan tinggi. Uji akurasi berkisar 96,54% - 98,99%. Metode analisis yang diperoleh sudah memenuhi kriteria penerimaan sesuai persyaratan validasi. Kata kunci : Mangiferin, Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri, Validasi Metode Analisis, Plasm