Desarrollo de modelos experimentales de prótesis de córnea humanizada autóloga

La regeneración corneal es una etapa esencial en la restitución de la normalidad anatómica en las patologías debilitantes de la córnea. El objetivo en esta tesis doctoral es el desarrollo de biomateriales transportadores de células autólogas humanas de tipo pluripotencial, con la finalidad de promover la integración de dichos biomateriales y regenerar el estroma en las córneas estructuralmente debilitadas. En una primera fase analizamos las propiedades físicas in vitro de injertos porosos de 90[my]m de espesor de polietilacrilato (PEA) y estroma corneal humano descelularizado, además de analizar la capacidad de proliferación, infiltración y adhesión de células madre derivadas del tejido adiposo humano (ADASC) sobre los mismos. En una segunda fase se estudió el comportamiento in vivo de estos dos tipos de implantes con y sin colonización celular mediante un ensayo controlado y triple enmascarado, usando un modelo experimental de conejo albino neozelandés. Los implantes se introdujeron dentro de bolsillos instraestromales disecados manualmente y se realizó un seguimiento completo de 3 meses, donde se analizaron clínicamente la inyección conjuntival, trasparencia y vascularización corneal. Tras la eutanasia de los conejos se realizó un análisis histológico e histoquímico con el objetivo de evaluar la supervivencia de las ADASC y su diferenciación en queratocitos adultos. La prótesis de PEA con un 10% de hidroxietilacrilato redujo drásticamente su tasa de extrusión, pudiendo ser utilizado como scaffold en futuros modelos de queratoprótesis. Las láminas de córnea humana descelularizada con posterior recelularización demostraron una óptima biointegración en el estroma corneal en ausencia de respuesta inflamatoria alguna, además de permitir una mejor supervivencia y diferenciación de las células madre en comparación con las membranas de PEA. Este modelo de trasplante lamelar mediante descelularización con posterior recelularización con células madre extraoculares permite la obtención de injertos lamelares funcionalizados autólogos a partir de córneas alogénicas