Caracterización del compartimento no tumoral del sistema inmunitario en pacientes con LLC-B y su relación con la expresión

Los pacientes con LLC-B tienen una media de supervivencia de 10 años, si bien de manera individual presentan un pronóstico muy variable. Esta heterogeneidad hace necesario que los pacientes se encuentren clasificados por grupos de diferente pronóstico que permitan no sólo predecir la evolución de la enfermedad sino también tomar las decisiones terapéuticas adecuadas. Dentro de los diferentes parámetros moleculares estudiados para predecir la evolución de la enfermedad, la expresión de ZAP-70 por parte de las células B leucémicas se presenta como uno de los mejores factores pronósticos dada la alta correlación existente con el estado mutacional de la IgVH y su sencilla determinación en el laboratorio por diferentes técnicas. Los mecanismos patogénicos de la LLC-B se conocen de forma parcial. Sin embargo, se ha demostrado la existencia de alteraciones en los compartimentos linfocitarios y de células accesorias que no han sufrido la transformación leucémica. Estos hallazgos han sugerido la existencia de alteraciones en la distribución de las grandes poblaciones linfocitarias T y NK además de anomalías en su capacidad funcional. Sin embargo no se ha establecido el carácter universal de la afectación linfocitaria T y NK y de células dendríticas o de forma preferencial de algunas de sus subpoblaciones. La existencia de diferentes patrones de anomalías biológicas en el sistema inmune de los pacientes con LLC-B podría contribuir a comprender la variabilidad de la enfermedad y su potencial relevancia en la patogenia de la expansión clonal leucémica. Con estos fundamentos nos planteamos investigar en sangre periférica de pacientes con LLC-B clasificados por la expresión en las células leucémicas de ZAP-70 y de controles sanos: 1. Distribución de las poblaciones monocitarias, de células dendríticas, de linfocitos B, linfocitos T y de células NK. 2. Supervivencia y apoptosis de los linfocitos T. 3. Capacidad de producción de citocinas de los linfocitos T. Del estudio sobre los compartimentos de células del sistema inmunitario circulante de pacientes con LLC-B en fase estable de la enfermedad y estratificados por la expresión de ZAP-70 se obtienen las siguientes conclusiones presentadas de acuerdo con el orden de los objetivos planteados: 1. Los pacientes ZAP-70+ presentan una marcada redistribución significativa del compartimento de células dendríticas circulantes consistente en una expansión de las mieloides tipo II (mDC2) y una retracción de las mieloides tipo I (mDC1) y de las plasmacitoides (pDC). 2. Los pacientes ZAP-70+ muestran una redistribución significativa del compartimento monocitario circulante con un incremento de las subpoblaciones CD14?CD16+high y CD14+lowCD16+high y una disminución de las CD14+hiCD16?. La enfermedad se asocia a una monocitopenia con descenso de la expresión de moléculas implicadas en la coestimulación y en la migración celular de la mayoría de las subpoblaciones monocitarias. 3. Los pacientes con LLC-B y de forma significativamente mayor en los ZAP-70+ que en los ZAP-70?, presentan una profunda redistribución del compartimento de linfocitos T CD4+, con un incremento significativo de linfocitos T CD4+ efectores y un descenso significativo de linfocitos T novatos. 4. La enfermedad se asocia a una linfocitosis T CD8+, que presenta una significativa redistribución de sus subpoblaciones en los pacientes ZAP-70+ caracterizada con una disminución de los linfocitos T CD8+ novatos y memoria efectora asociada a un aumento de los linfocitos memoria central. 5. Los pacientes ZAP-70+ presentan de forma concomitante disminución de células NK (CD3?CD56+) y aumento de células TK (CD3+CD56+) con incremento de expresión de marcadores de activación celular. 6. Las poblaciones linfocitarias T CD4+ y CD8+ y sus diferentes subpoblaciones de los pacientes ZAP-70+ muestran significativamente una menor apoptosis espontánea en fresco y muy incrementada tras cultivo in vitro. Además existe una fuerte correlación entre el incremento de apoptosis espontánea detectada en linfocitos T CD4+ y CD8+ y los valores del número absoluto y del porcentaje de las poblaciones de linfocitos T CD4+ y CD8+ CD45RO+CD95+ en los pacientes con LLC-B ZAP-70+. 7. En los pacientes con LLC-B existe una redistribución del compartimento linfocitario T CD4+ con un predominio del patrón de producción de citocinas Th1 (alta producción de IL-2, IFN-¿ y TNF-¿). En los pacientes ZAP-70+ se observa un incremento de los linfocitos T CD4+ con un patrón de producción de citocinas Th2 (alta producción de IL-4 e IL-10) con respecto a los ZAP-70?, siendo las subpoblaciones de linfocitos novatos y efectores las preferentemente implicadas en estas alteraciones. 8. La expresión de ZAP-70+ se asocia a una mayor linfocitosis de células B CD5+, CD38+ y CD40+ y una disminución del porcentaje del porcentaje de células B CD19+ que expresan CD80+ y CD86+. Tomadas en conjunto, nuestras conclusiones demuestran un compromiso de las poblaciones del sistema inmunitario circulantes que no han sufrido transformación tumoral en los pacientes con LLC-B, que es diferente en los pacientes ZAP-70? y ZAP-70+, y que pueden implicarse en la patogenia del distinto compartimento clínico de ambos grupos