Effect of sperm concentration and incubation period of oocyte-spermatozoa on in vitro fertilization in the Gir breed

Avaliou-se o efeito de concentrações espermáticas e períodos de incubação na fecundação in vitro com sêmen de touros Gir (Bos indicus). Oócitos maturados in vitro foram fecundados com sêmen de dois touros, nas concentrações de 1, 2 ou 4x106 espermatozóides/mL, por 12 ou 18 horas, e avaliada a taxa de fecundação e polispermia. Posteriormente, foi avaliada a taxa de clivagem com 72 horas e de blastocisto no oitavo dia pós-fecundação. Um segundo experimento verificou o efeito de 1, 2 e 4x106 espermatozóides/mL por 18 horas, utilizando sêmen de três touros separadamente, bem como o efeito de 12 e 18 horas de incubação, na concentração de 1 a 2x106 espermatozóides/mL. Observou-se maior (P < 0,05) polispermia na concentração de 4x106 espermatozóides/mL e que a associação dessa concentração com 18 horas aumentou a taxa de clivagem (P < 0,05). No segundo experimento, o aumento do período de incubação melhorou (P < 0,05) a taxa de clivagem para um dos touros e, quando comparados entre si, os animais produziram taxa de clivagem e de blastocistos diferentes (P < 0,05) em uma mesma concentração ou período de incubação. Os resultados revelaram que a polispermia é o principal efeito do aumento da concentração espermática e que a eficiência entre touros na fecundação in vitro é dependente da concentração e período de incubação.This research evaluated the effect of sperm concentrations and incubation periods among oocyte-spermatozoa on in vitro fertilization with semen of Gir bulls (Bos indicus). In vitro matured oocytes were fertilized with sperm of two bulls, on concentrations of 1, 2 or 4x106 spermatozoa/mL during 12 or 18 hours of incubation, and evaluated the fertilization and polyspermy rate as well as cleavage on 72 hours and blastocyst on eighth day post-fertilization. A second experiment evaluated the effect of concentrations of 1, 2 or 4x106 spermatozoa/mL for 18 hours using sperm of three bulls individually, as well as the effect of 12 and 18 hours of incubation in a concentration of 1 to 2x106 spermatozoa/mL. It was observed an increase (P < 0.05) on polyspermy when the concentration was 4x106 spermatozoa/mL and that the association of this concentration with 18 hours increased (P < 0.05) cleavage rate. The second experiment verified that the increase of incubation period improved (P < 0.05) cleavage rate of one bull, and that when compared among themselves the bulls sperm resulted in different (P < 0.05) cleavage and blastocyst rate in the same concentration or incubation period. The results showed that polyspermy is the main effect of sperm concentration increase and that the efficiency among bulls on in vitro fertilization is dependent on concentration and incubation period