Bioensayo de la enterotoxina termoestable de E. Coli

The production of thermostable enterotoxin by a strain of E. coli was demostrated by the permeability factor assay in the guinea pig's skin (Cavia cobaya). We injected intradermically 0.1 ml. of suspension of the strain diluted in a buffer solution of borate, pH 7.5, and after 1 hour we measured the blue spots on the skin, produced by an intravenously injected dye (Coomasie's blue). In the same way, suspension of strains cultured in cysteine supplemented media were tested, as well, as the supernatant of the culture free of cells, and several fractions obtained in the purification of the enterotoxin. The strain suspension, and the supernatant of the culture free of cells, produced blue spots of 6.8 and 0.4 cm of diameter with and intensity of 10 and 3 respectively. The cysteine supplementation of the culture media did not increase the production of enterotoxin. Finally, the bioassay was positive for the fractions obtained in the purification of the enterotoxin.Se comprobó la producción de enterotoxina termoestable en una cepa de E. coli, mediante el ensayo del factor de permeabilidad en la piel del curi (Cavia cobaya), inyectando intracutáneamente 0.1 ml de suspensión de la cepa en solución reguladora de borato a pH 7,5 y midiendo después de una hora la intensidad y el diámetro de las manchas azules producidas en la piel, por un colorante inyectado intravenosamente. Igualmente, se probaron las suspensiones de cepas provenientes de cultivos suplementados con cisteína, el sobrenadante del cultivo incubado libre de células y varias fracciones obtenidas en la purificación de la enterotoxina. La suspensión de cepa y el sobrenadante del medio de cultivo libre de células. originan manchas azules con 6.8 y 0,4 cm de diámetro, cuyas intensidades fueron 10 y 3, respectivamente. La suplementación del medio de cultivo con cisteína no mejoró la producción de enterotoxina según este bioensayo. Finalmente, se encontró positivo el bioensayo para las fracciones obtenidas en la primera etapa de la purificación de la enterotoxina