Estrategia de PCR múltiple para la caracterización molecular simultánea de Staphylococcus aureus y enterotoxinas estafilocócicas en aislamientos de brotes de origen alimentario

Introduction: Staphylococcal food poisoning is the most frequent type of food poisoning around the world. Staphylococcus aureus enterotoxins cause significant loss of water in the intestinal lumen, followed by vomiting and diarrhea. Objective: To report a fast, reliable and inexpensive strategy based on multiplex PCR for the simultaneous identification of S. aureus and detection of five classical S. aureus enterotoxin genes (sea, seb, sec, sed, see) in Staphylococcus spp. strains isolated from food poisoning outbreaks. Materials and methods: We analyzed isolates from 12 food poisoning outbreaks occurred in Santa Fe province (Argentina). Isolation and phenotypic characterization were carried out by standard procedures. Genotypic analysis was performed by multiplex PCR, using primers for nuc, sea-see and 16S rRNA genes simultaneously. Results: Of all the strains tested, 58% were found to carry toxigenic genes. Sea and seb toxins were found at the same percentage (29%) while sec, sed and see genes were found in a lower and identical proportion (14%). We did not find more than one different type of S. aureus enterotoxin in the isolates analyzed. Conclusions: The multiplex PCR strategy designed in this work has enabled us to identify strains of S. aureus and detect -at the same time- their enterotoxigenic ability. At present, our efforts are devoted to the detection of genes encoding enterotoxins other than the classical ones, in order to know their impact on staphylococcal food poisoning, as well as to investigate their relevance to our country’s public health. http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v33i1.816 Introducción. La intoxicación alimentaria estafilocócica es la más frecuente de las intoxicaciones alimentarias. La acción de las enterotoxinas de Staphylococcus aureus en la luz intestinal provoca una importante pérdida de agua que origina vómitos y diarrea. Objetivo. Presentar una estrategia rápida, fiable y de bajo costo, basada en una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) múltiple para, simultáneamente, identificar S. aureus y detectar genes de las cinco enterotoxinas clásicas de S. aureus (sea, seb, sec, sed, see) en cepas de Staphylococcus spp. aisladas de alimentos. Materiales y métodos. Se trabajó con aislamientos recuperados de 12 brotes de intoxicación alimentaria estafilocócica ocurridos en la provincia de Santa Fe, Argentina. El aislamiento y la caracterización fenotípica se llevaron a cabo mediante procedimientos estándar. La evaluación genotípica se hizo por una PCR múltiple, utilizando simultáneamente cebadores para los genes nuc, sea-see y 16S rRNA. Resultados. En las cepas analizadas se detectó 58 % de portadoras de genes toxigénicos. Las toxinas sea y seb se encontraron en igual porcentaje (29 %), mientras que las sec, sed y see se encontraron en menor e idéntica proporción (14 %). No encontramos más de un tipo diferente de enterotoxinas de S. aureus en los aislamientos analizados. Conclusiones. La estrategia de PCR múltiple diseñada en este trabajo permitió identificar cepas de S. aureus y confirmar, al mismo tiempo, su enterotoxigenicidad. En estos momentos, nuestros esfuerzos están dirigidos a detectar los genes que codifican enterotoxinas distintas de las clásicas, a fin de conocer su incidencia en las intoxicaciones alimentarias estafilocócicas e investigar su relevancia en la salud pública de nuestro país. doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v33i1.816