Edición génica para terapia génica del síndrome de Wiskott-Aldrich

Los grandes avances que están teniendo lugar en el campo de la Edición Genómica (EG), particularmente desde la irrupción del sistema CRISPR en éste, están cambiando la forma de abordar la investigación en biología molecular y biomedicina, y plantean un escenario donde estrategias basadas en EG se presenten como alternativa terapéutica para el tratamiento de determinadas enfermedades. Principalmente, podrían verse beneficiadas por este tipo de estrategias ciertas enfermedades monogénicas que hasta la fecha solo cuentan con tratamientos dirigidos a paliar su sintomatología, o para las que acceder a un tratamiento curativo no siempre es posible. En este tipo de afecciones, la reparación del gen alterado mediante EG representa una alternativa prometedora para revertir la enfermedad. Una de las enfermedades para cuyo tratamiento podrían diseñarse estrategias de EG en un futuro es el Síndrome de Wiskott-Aldrich (WAS). WAS es una inmunodeficiencia primaria, de herencia recesiva ligada al cromosoma X, causada por mutaciones en el gen WAS. En la parte final de la tesis se procedió a abordar la EG del locus WAS en células T y HSCs, utilizando los sistemas que mejores resultados nos habían dado en nuestros modelos. Estos datos mostraron que la nucleofección de RNP es el método de elección para la EG de células T y HSCs, y que combinándolo con donadores como productos de PCR, permite editar el locus WAS en HSCs y células T. Sin embargo, la eficiencia es todavía mejorable y pudimos detectar varios cortes en sitios fuera de diana, tanto en las células T como en las HSCs. Por lo tanto, aunque la EG es un abordaje interesante y posible para llevarlo a clínica para el tratamiento de WAS, requiere de nuevas optimizaciones para incrementar la eficacia y la seguridad.Tesis Univ. Granada.This study is financed by the ISCIII Health Research Fund (Spain) and the European Regional Development Fund (FEDER) through research grants PI12/01097 and PI15/02015 (F.M.) and CD09/0020, PI15/00794, and CPII15/00032 (P.A.); the ISCIII Cellular Therapy Network (TerCel, RD12/0019/0006) (F.M.); a Juan de la Cierva fellowship (JCI_2012_12666; to R.M.); the CICE and CS of the Junta de Andalucía FEDER/European Cohesion Fund (FSE) for Andalucía 2007-2013 through research grants P09-CTS-04532, PI-57069, PI- 0001/2009, and PAIDI-Bio-326 (F.M.) and PI-0160/2012 and PI- 0014-2016 (K.B.); the Ministerio de Economía, Industria y competitividad through research grant SAF2017-89745-R (J.L.G.-P.); a RYC contract. (RYC-2015-18382; to P/J.R.); an FPU fellowship (FPU16/05467; to M.T.-M.); a PEJ contract (PEJ-2014-A-46314; to A.B.C.-G. and PEJ-2014-A-17105 S.S.-H.); the European Research Council (ERC-Consolidator ERC-STG-2012-233764); and a private donation from Ms. Francisca Serrano (Trading y Bolsa para Torpes, Granada, Spain).We also wish to thank Michael O’Shea for proofreading the article. J.L.G.-P’s lab is supported by MINECO-FEDER (SAF2017-89745-R).PI-0407/2012, PI-0318/2014 (M.C.