Sammenligning av selektive dyrkningsmedier for påvisning av Aeromonas

Metoden for påvisning av Aeromonas utarbeidet av Nordisk Metodikkomité for næringsmidler (NMKL) er ikke optimal. Dyrkningsmediet Stivelses Ampicillin Agar (SAA) som blir benyttet etter denne standarden har vist seg å være lite selektivt og tidskrevende å produsere. Uten flere verifiseringstester er det derfor vanskelig å påvise Aeromonas fra næringsmidler med en blandet mikroflora. Hovedmålet med denne bacheloroppgaven var å sammenligne stivelse ampicllin agar (SAA) med to andre kommersielle selektive dyrkningsmedier. Disse var følgende: “Bile Salt Irgasan Brilliant Green agar” (BSIBG) og Aeromonas agar (Ryan). Oppgavens første delmål var å dyrke opp Aeromonas- og sammenligne og dokumentere deres vekst på de tre selektive mediene. For å undersøke medienes evne til å isolere Aeromonas fra en blandet mikroflora ble det tatt bakteriologiske analyser av laks, reker, røye, salat og spirer. Det ble både tatt analyser av den naturlig tilstedeværende mikrofloraen i næringsmidlene, i tillegg til lakseprøver som var kunstig kontaminert med en Aeromonas-kultur. Et utvalg av kolonier ble plukket for videre verifisering. Det ble utført polymerase chain reaction (PCR) av 16S rRNA for identifisering av presumtive og ikke-presumtive Aeromonas-isolater fra næringsmiddelprøvene. PCR-produktene ble sendt til sekvensering til et eksternt laboratorium. Resultatene viste små forskjeller mellom SAA og BSIBG sin evne til å inhibere ikke-Aeromonas arter, Ryan ble vist til å ha noe dårligere selektivitet. Det kunne ikke identifiseres Aeromonas fra noen næringsmidler med unntak av de kunstig kontaminerte prøvene. Ved tilsetning av kulturen viste alle mediene evne til å gjenfinne Aeromonas, men det lyktes ikke å kvantifisere Aeromonas med tilsvarende konsentrasjon som ble tilsatt lakseprøven. Pseudomonas viste seg å være en dominerende slekt på flere av produktene og hadde et lignende koloniutseende som Aeromonas på både SAA og Ryan. På grunn av BSIBG sin evne til å differensiere enkelte Pseudomonas-arter med et koloniutseende som skiller seg fra Aeromonas, og i tillegg til at mediet er svært enkelt å tillage, kan det være et bedre alternativ enn SAA