Factors affecting hemp (Canabis sativa L.) callus genesis in somatic tissue culture

ISSN 2424-4120 (Online)Tyrimai atlikti Aleksandro Stulginskio universiteto Agronomijos fakulteto Biologijos ir augalų biotechnologijos institute ir Jungtinio tyrimų centro Agrobiotechnologijos laboratorijoje. Tirtas augimo reguliatorių poveikis sėjamosios kanapės kaliaus indukcijai izoliuotų hipokotilių, skilčialapių ir lapų kultūrose. Izoliuoti hipokotilių, skilčialapių ir lapų segmentai auginti Murashige ir Skoog (MS) maitinamojoje terpėje be augimo reguliatorių bei papildytoje skirtingais zeatino (ZT) ir αnaftilacto rūgšties (NAR) arba indolilacto rūgšties (IAR) deriniais bei skirtingais tidiazurono (TDZ) ir αnaftilacto rūgšties (NAR) arba indolilacto rūgšties (IAR) deriniais. Genotipų ‘KAN-30’ ir ‘KAN-38’ didžiausias kaliaus susiformavimo dažnis izoliuotų hipokotilių kultūroje nustatytas auginant eksplantus maitinamojoje terpėje, papildytoje 2,0 mg l –1 ZT + 1,0 mg l –1 IAR, o genotipo ‘KAN-34’ – maitinamojoje terpėje, papildytoje 1,0 mg l –1 ZT + 0,5 mg l –1 NAR. Izoliuotų skilčialapių kultūroje ląstelių dedifereciacijos procesą labiausiai stimuliavo 2,0 mg l –1 ZT + 1,0 mg l –1 NAR derinys. Optimalus augimo reguliatorių derinys kaliaus indukcijai izoliuotų lapų kultūroje turi būti parenkamas konkrečiam genotipui. Izoliuotų lapų kultūroje vidutinis kaliaus susiformavimo dažnis buvo 4,8–5,6 karto didesnis, palyginti su vidutiniu kaliaus susiformavimo dažniu izoliuotų hipokotilių kultūroje, bei 2,7–3,1 karto didesnis, palyginti su vidutiniu kaliaus susiformavimo dažniu izoliuotų skilčialapių kultūrojeResearch was carried out at the Institute of Biology and Plant Biotechnology of Aleksandras Stulginskis University and at the Laboratory of Agrobiotechnology of the Joint Research Centre. The effect of growth regulators on the callus induction from hypocotyl, cotyledon and leaf explants was evaluated. The isolated explants were cultivated in the MS medium without growth regulators and supplemented with different zeatine (ZT) and α-naftilacetic acid (NAA) or indoleacetic acid (IAA) combinations and thidiazuron (TDZ) and ɑnaftilacetic acid (NAA) or indoleacetic acid (IAA) combinations. The highest callus formation frequency from hypocotyl explants was obtained in the medium supple - mented with 2.0 mg l –1 ZT + 1.0 mg l –1 IAA (‘KAN-30’ and ‘KAN-38’) and – 1.0 mg l –1 ZT + 0.5 mg l –1 NAR (‘KAN-34’). The combination of 2.0 mg l –1 ZT with 1.0 mg l –1 NAA was most appropriate for the callus induction from cotyledon explants. The optimal combination of growth regulators for callus induction from leaf explants should be selected for a specific genotype. The mean rate of callus formation frequency from leaf explants was 4.8–5.6 times higher in comparison with the mean frequency form hypocotyl explants and 2.7–3.1 times higher as compared to the mean frequency from cotyledon explantsVytauto Didžiojo universitetasŽemės ūkio akademij