Nanomateriály z chitosanu s klostridiální kolagenázou pro regenerativní medicínu

Účelem této práce je příprava a charakterizace nanočástic z chitosanu, které sloužily jako nosič mikrobiální kolagenázy (EC 3.4.24.3) a jejich srovnání s chitosanovými nanovlákny s kolagenázou. Proteolyticky vysoce aktivní a stabilní nosiče mají potenciál pro pokročilé kryty ran. Morfologie a mikrostruktura nanočástic a nanovláken byly sledovány pomocí rastrovacího elektronového mikroskopu. Hydrodynamická velikost připravených nanočástic byla sledována měřením dynamického rozptylu světla s použitím nízkomolekulárního chitosanu a TPP v poměru 2: 1 byla v rozsahu 130 - 142 nm. Pro kvantifikaci specifické aktivity kolagenázy imobilizované na obou biomateriálech byla použita metoda hydrolýzy peptidového substrátu (Pz-peptidu) a hodnoty byly 0,545 × 10-3 U/mg nanovláken a 0,684 × 10-3 U/mg nanočástic. Stabilita při skladování a operační stabilita kolagenázy na chitosanových nanovláknech a chitosan/TPP nanočásticích neklesla pod 73 % původní aktivity.The purpose of the paper is to describe the production and characterization of chitosan nanoparticles and electrospun chitosan nanofibers as carriers for microbial collagenase. These proteolytic highly active and stable carriers have potential of advanced bioactive wound dressings. The morphology and the microstructure of nanofibers and nanoparticles were examined using a scanning electron microscopy and dynamic light scattering. Low molecular weight chitosan/TPP nanoparticles prepared ratio 2:1 showed size range 130 – 142 nm. Specific collagenase activity 0.545 x 10-3 U/ mg for chitosan nanofibers and 0.684 x 10-3 U/mg of nanoparticles was quantified using the hydrolysis of a peptidic substrate (Pz-peptide) and is expressed per mass of chitosan biomaterial. Storage stability and reusability collagenase chitosan nanofibers and collagenase chitosan nanoparticles did not fall under 73% of original activity