Ricerca di Norovirus in molluschi bivalvi immessi in commercio in Emilia Romagna, Italia

I Norovirus (NoV) sono piccoli virus a RNA della famiglia Caliciviridae responsabili di gastroenteriti nell’uomo. L’infezione può trasmettersi per via alimentare tramite il consumo di molluschi bivalvi. Questi animali, infatti, in quanto filtratori, possono accumulare diversi contaminanti, compresi i virus enterici umani come i NoV. Sulla base dell’analisi genetica, i NoV possono essere suddivisi in 5 genogruppi (GI-GV), di questi, nell’uomo sono stati evidenziati prevalentemente i genogruppi GI e GII. Recentemente è stata evidenziata anche la presenza di NoV GIV. Lo scopo di questo lavoro è quello di ricercare la presenza di NoV in molluschi bivalvi immessi in commercio in Emilia Romagna prelevandoli direttamente dai banchi di vendita, al fine di valutare il possibile rischio per i consumatori finali. Sono stati raccolti e analizzati 95 lotti di molluschi di cui 41 di vongola filippina (Venerupis philippinarum), 29 di mitilo (Mytilus galloprovincialis), 20 di ostrica concava (Crassostrea gigas), 2 di fasolare (Callista chione), 2 di vongola comune (chamelea gallina) e 1 di ostrica comune (Ostrea edulis). Pool di epatopancreas sono stati trattati con la Proteinasi K al fine di digerire il tessuto analizzato e liberare in tal modo la componente virale, quindi l’RNA è stato estratto con un kit commerciale. La ricerca del virus è stata condotta con tecnica RT-PCR one-step utilizzando i primers JV12-JV13, specifici per la regione dell’RNA-polimerasi, che amplificano un frammento di 326 bp di NoV sia GI che GII. Successivamente, è stata condotta una caratterizzazione utilizzando due seminested-PCR specifiche per i due genogruppi. Alcuni prodotti di PCR sono stati sottoposti a sequenziamento ed analisi filogenetica. NoV è stato evidenziato in campioni di vongole filippine, mitili e ostriche concave per un totale di 14 lotti (14,7%). I campioni più contaminati sono risultati quelli di vongola filippina (22%) rispetto a mitili e ostrica concava (10%). Entrambi i Genogruppi erano presenti in vongola filippina e mitilo, mentre in ostrica concava è stato evidenziato solo NoV GI. Quattro lotti sono risultati contaminati sia da GI che da GII. Il sequenziamento e l’analisi filogenetica hanno evidenziato la presenza dei genotipi GII.4, GII.g e GII.b nell’ambito del genogruppo II. L’evidenziazione di una alta diffusione di NoV in molluschi bivalvi immessi in commercio sottolinea l’inadeguatezza dei sistemi di controllo attualmente in atto. Ulteriori screening sui molluschi bivalvi e l’implementazione dei sistemi di controllo sono da perseguire, al fine di prevenire le infezioni umane su base alimentare