DETERMINACIÓN DEL EFECTO DE Calendula officinalis SOBRE LOS NIVELES DE EXPRESIÓN DE MARCADORES TUMORALES EN CÁNCER DE PULMÓN

El Cáncer es una enfermedad que se caracteriza por una proliferación celular descontrolada con altos índices de mortalidad y es un problema importante de salud a nivel mundial. En México fue la segunda causa de muerte en el 2010. Debido a la importancia de la enfermedad, actualmente existen quimioterapias enfocadas a la eliminación de células tumorales. Nuestro grupo de investigación ha realizado la búsqueda sistemática de agentes antitumorales de origen natural, que presenten actividad citotóxica con mayor eficacia en líneas celulares de origen tumoral y probablemente con menores efectos secundarios. Derivado del conocimiento de que plantas como Calendula officinalis han sido utilizadas de manera tradicional para el tratamiento de algunos padecimientos, entre ellos se considera su posible efecto antitumoral. En búsqueda de nuevos principios activos antitumorales se decidió evaluar un probable efecto inhibidor de la proliferación en el extracto hidroalcohólico de Caléndula sobre dos líneas celulares: la línea celular A549 de adenocarcinoma de pulmón y la línea MRC-5 de pulmón normal inmortalizado. Para determinar cambios en la viabilidad se realizaron ensayos de MTT en ambas líneas, los resultados indican que el extracto de Caléndula por sí solo, induce un incremento de la viabilidad del 40% sobre la línea A549 y la viabilidad no cambia en la línea MRC-5. En los ensayos de proliferación mediante la identificación de un marcador nuclear que se sintetiza en la fase de G1 y S del ciclo celular, la proteína PCNA, los resultados mostraron que en la línea A549 el extracto induce proliferación celular. Así mismo se realizó la técnica de Anexina V, se observó que el extracto por sí solo no induce apoptosis. Consecutivamente se realizaron experimentos para observar si el efecto del extracto hidroalcohólico de Calendula officinalis coopera o interfiere con el efecto de un fármaco antitumoral de elección en cáncer de pulmón, como lo es Taxol. Los resultados mostraron que al realizar los experimentos empleando la mezcla del extracto de Caléndula + Taxol al mismo tiempo, los efectos citotóxicos son más eficientes que al usar el Taxol por sí solo y los resultados pueden observarse a tiempos más cortos (3-6 h). Además el tratamiento es capaz de inducir apoptosis en las células A549 de origen tumoral, pero no en la línea MRC-5. En conclusión mientras el extracto de Caléndula por sí solo, induce un incremento en la proliferación celular, combinado con el antitumoral Taxol sorprendentemente induce citotoxicidad y se potencia el efecto de inducción de la apoptosis. La presencia de flavonoides con actividad antioxidante y pro-oxidante, contenidos en el extracto hidroalcohólico puede ser el principio que explique este resultado. Por otra parte al evaluar una probable alteración de la proliferación usando inhibidores del canal KCNMA1 se observó que los ensayos de viabilidad realizados en ambas líneas celulares, en presencia del inhibidor específico del canal KCNMA1 (Caribdotoxina), no mostraron cambios significativos que sugieran una modulación de la viabilidad atribuible al canal