Comparativa metodológica y propuesta de un protocolo para la extracción y detección mediante fluorescencia de microplásticos en muestras biológicas

[spa] La producción de plástico incrementa anualmente debido a la necesidad de abastecer la creciente demanda de este tipo de material, y se estima que el 80 % de la contaminación marina se origina en tierra. En el medio marino, el plástico afecta desde el equilibrio de los ecosistemas, hasta la supervivencia de los organismos marinos. La presencia de residuos plásticos en sedimento y biota ya ha sido demostrada mediante técnicas de extracción de microplásticos e identificación visual. Pero, la ausencia de un protocolo validado que permita extraer fragmentos plásticos de material biológico para su posterior identificación mediante tinción fluorescente pone de manifiesto el peligro de subestimar la cantidad de plástico ingerida por lola biota al no tener en cuenta aquellos fragmentos que se escapan a la identificación visual. Esto hace necesario diseñar un protocolo estandarizado que pueda ser aplicado de forma rutinaria en la investigación sobre la ingesta de plástico por organismos marinos. Así, los objetivos de este trabajo son: (1) realizar una comparativa metodológica de la bibliografía publicada sobre procedimientos de extracción de MPs de una matriz biológica e identificación mediante fluorescencia; (2) diseñar un protocolo para la extracción de MPs en una matriz biológica y su observación mediante fluorescencia; y (3) validar y estandarizar dicho protocolo.[eng] Plastic production increases annually due to the need to supply the growing demand for this type of material, and it is estimated that 80% of marine pollution originates on land. In the marine environment, plastic affects from the balance of ecosystems, to the survival of marine organisms. The presence of plastic waste in sediment and biota has already been demonstrated by techniques of extraction of microplastics and visual identification. However, the absence of a validated protocol that allows extracting plastic fragments of biological material for subsequent identification by fluorescent staining reveals the danger of underestimating the amount of plastic ingested by the biota by not taking into account those fragments that escape the visual identification This makes it necessary to design a standardized protocol that can be applied routinely in the research on the ingestion of plastic by marine organisms. Thus, the objectives of this work are: (1) to make a methodological comparison of the published literature on procedures for extracting MPs from a biological matrix and identification by fluorescence; (2) design a protocol for the extraction of MPs in a biological matrix and its observation by fluorescence; and (3) validate and standardize said protocol