Un modello in vivo per la valutazione della terapia anti-gene PNA-mediata nel neuroblastoma e altre patologie oncologiche con sovraespressione di N-myc.

INTRODUZIONE E OBIETTIVI: Il neuroblastoma è una neoplasia pediatrica molto aggressiva in cui l’amplificazione dell’oncogene N-myc - associata al 25% dei casi - è indicativa di prognosi infausta. La sola espressione di N-myc umano nelle surrenali induce la formazione di neuroblastomi in topi transgenici, suggerendone un ruolo critico nella patogenesi di questa neoplasia. Studi in vitro mostrano che la sovraespressione di N-myc porta a un aumento del potenziale metastatico; evidenza che correla col comportamento maligno dei tumori pediatrici con amplificazione di N-myc. Abbiamo precedentemente dimostrato che un acido peptidico-nucleico (PNA) anti-N-myc è in grado di inibire selettivamente l’espressione di questo oncogene in linee cellulari di neuroblastoma, con conseguenti riduzione della vitalità fino all’80-90% e ripristino dell’accumulo di cellule in G1. L’obiettivo del nostro progetto è lo studio preliminare dell’efficacia di questa terapia in vivo, attraverso l’utilizzo di un semplice e innovativo modello transgenico. METODI: Drosophila è un modello genetico semplice e affidabile nel cui genoma sono presenti gli omologhi funzionali di molti geni umani correlati al cancro, tra cui l’omologo di c-myc. Noi abbiamo inserito nel genoma di Drosophila la sequenza codificante dell’oncogene N-myc umano; la sua espressione attraverso un sistema binario inducibile sarà quantificata prima e dopo somministrazione di differenti dosi di PNA anti-N-myc, valutando così per la prima volta l’efficacia in vivo di questa terapia anti-gene. RISULTATI: Dopo l’ottenimento delle linee transgeniche, abbiamo iniziato la caratterizzazione dei promotori che utilizzeremo per fare esprimere l’oncogene N-myc nelle diverse popolazioni di derivazione neuroectodermica. Tali promotori erano stati da noi precedentemente selezionati in uno screening di fenotipi da sovraespressione di c-myc1. CONCLUSIONI: La valutazione dell’efficacia di una terapia anti-gene PNA-mediata in un organismo geneticamente flessibile come Drosophila, per il quale esistono strumenti analitici estremamente potenti e raffinati, consentirà di ottenere, in tempi brevi e a costi estremamente contenuti, una mole di dati che, anche se preliminari, saranno di grande aiuto nella selezione di tipologie di analisi più mirate nei modelli superiori