PREPARACIÓN DE MEMBRANAS PLASMÁTICAS Y EXPRESIÓN DE ACUAPORINAS EN Echinocactus grusonii Hildm. (CACTACEAE)

Las cactáceas son plantas notables por sus importantes adaptaciones morfológicas y fisiológicas a la sequía. Tienen un amplio rango de distribución y muchas de ellas habitan en regiones áridas y semiáridas donde el principal factor limitante es el agua. Entre sus adaptaciones morfológicas a la sequía se encuentran aquellas que disminuyen la pérdida de agua y/o favorecen su almacenamiento, tales como: a) Hojas reducidas a escamas; b) El engrosamiento de la cutícula; c) Una disminución en la densidad estomática; d) El desarrollo de tejidos de almacenamiento; y e) Una baja proporción superficie / volumen. Entre sus adaptaciones fisiológicas a la disponibilidad intermitente de agua se encuentra el Metabolismo Ácido de Crasuláceas (ciclo CAM) 1, que implica básicamente: a) La apertura nocturna de los estomas y la fijación del CO2 en ácidos orgánicos y su acumulación en la vacuola; y b) La removilización diurna de los ácidos orgánicos y su descarboxilación acoplada a la entrada del CO 2 en el Ciclo de Calvin. Echinocactus grusonii Hildm. (subfamilia Cactoideae) es una especie que habita en las regiones áridas de los estados de Querétaro y parte de Hidalgo (matorrales xerófilos), por lo que consideramos que es buen modelo de sistema para el estudio de los efectos del estrés hídrico. Para identificar factores asociados a la tolerancia a la sequía, analizamos los cambios en la abundancia de proteínas de membrana bajo condiciones de riego óptimo y bajo condiciones de estrés hídrico; para lo cual fue necesario adecuar un método de preparación de vesículas de membrana plasmática de E. grusonii. Los individuos se denominaron Cactus bien regados (WWc) y Cactus mal regados (WSc). La serie WWc fue regada una vez a la semana y la serie WSc permaneció sin riego (por 22 semanas) hasta el día de la preparación de membranas. La fracción microsomal se obtuvo con modificaciones según González de la Vara y Medina (1988) y estas membranas se prepararon en sistemas de partición de fases, gradientes discontinuos y continuos de sacarosa. Los resultados mostraron que los gradientes continuos 16-40% de sacarosa fueron los más adecuados para la preparación de membranas plasmáticas de E. grusonii (con sus respectivas modificaciones)