KONSTRUKSI PUSTAKA EKSPRESI METAGENOMIK BAKTERI DARI SISTEM DIGESTIF Achatina fulica DAN SELEKSI KLON REKOMBINAN DENGAN AKTIVITAS KITINASE

Beberapa macam enzim seperti enzim β-1,3-glukanase, enzim β-1,6-glukanase dan enzim kitinase yang dihasilkan oleh mikroba-mikroba dalam saluran digestif Achatina fulica memiliki potensi yang besar dan menarik untuk eksplorasi gen-gen baru. Pada penelitian ini dilakukan konstruksi pustaka ekspesi metagenomik untuk mendapatkan klon rekombinan dengan aktivitas enzim kitinase pada pustaka ekspresi metagenomik menggunakan substrat kitin. Tahapan yang dilakukan pada penelitian ini yaitu pengambilan cairan digestif Achatina fulica, isolasi DNA metagenom, konstruksi pustaka metagenomik, seleksi pustaka metagenomik dan seleksi klon rekombinan dengan aktivitas kitinase. Hasil yang optimal didapatkan pada titering pustaka metagenomik didapatkan perbandingan ligasi antara vektor dan DNA 2:3, menunjukkan jumlah plak 119 buah dan hasil titering sebanyak , p u ml. Uji aktivitas dengan penambahan substrat spesifik 4-nitrofenil N,N’–diasetil-β-D-kitobiosida positif, jika didapatkan plak dan halo