Measurement of succinylacetone in dried blood spots for early detection of tyrosinemia

의생명과학전공/석사혈액여과지검체 (Dry blood spot)로 시행하는 신생아선별검사에서 타이로신 농도가 정상보다 높은 타이로신혈증 (tyrosinemia)의 경우는 반드시 일시적인 신생아 타이로신혈증(transient neonatal tyrosinemia)과 제1형 타이로신혈증 (Type 1 tyrosinemia), 제 2형 타이로신혈증 (Type 2 tyrosinemia), 제 3형 타이로신혈증 (Type 3 tyrosinemia) 등을 감별 진단하여야 한다. 제 2형과 제 3형 타이로신혈증은 타이로신 농도가 아주 높게 나타나므로 쉽게 감별이 가능하지만 일시적인 신생아 타이로신혈증과 제1형 타이로신혈증은 타이로신 농도 만으로는 감별이 불가능하다. 별도 치료가 필요치 않고 일시적으로 높아지는 신생아 타이로신혈증과 조기치료가 반드시 필요한 제1형 타이로신혈증을 감별하기 위해서 추가 유기산검사를 시행하여 succinylacetone 증가 유무를 확인하는 것이 중요하다. 하지만 이는 신생아가 병원에 내원하여 다시 검체를 채취하여야 하고 유기산의 검사소요시간이 길기 때문에 빠른 결과 확인이 어렵다는 문제점이 있었다. 본 연구에서는 혈액여과지검체에 존재하는 succinylacetone을 이온화되기 쉽게 유도화시킨 후 이를 추출하여 미량 측정이 가능한 텐덤질량분석기를 이용하여 그 양을 측정하는 방법을 개발하였다. 개발한 측정방법은 CLSI(Clinical Laboratory Standard Institute) 지침에 따라 그 성능을 평가하였고 직선성(linearity), 검사 간 정밀도, 검사 내 정밀도, calibration의 안정성 등에서 모두 그 기준을 통과하여 우수한 검사 수행능을 보였다. 신생아선별검사에서 정상의 결과를 보였던 128개의 혈액여과지검체와 타이로신이 높았던 92개 혈액여과지검체의 succinylacetone 양을 측정하여 Medicalc 통계프로그램을 사용하여 참고치를 산정하였다. 정상은 116.8ng/mL이하, 일시적 신생아 타이로신혈증은 252.8ng/mL 이하로 나타났고 일시적 신생아 타이로신혈증의 참고치 보다 높은 결과를 보이는 경우에는 제1형 타이로신혈증을 의심하여 추가적인 검사를 시행하도록 권고할 예정이다. 본 연구에서 개발한 검사방법은 신생아선별검사에서 타이로신 농도가 정상보다 높은 경우, 별도의 검체 채취없이 잔여 혈액여과지검체에서 바로 succinylacetone을 측정함으로서 타이로신혈증 조기 감별진단에 대해 유용할 것으로 생각된다.restrictio