Inhibition of tumor cell proliferation of lymphokine-activated killer(LAK) cell culture supernatant

보건학과/석사[한글] Lymphokine-activated killer(LAK)세포는 다양한 종류의 암세포를 파괴할 수 있으며 임 상에 응용되어 암의 입양 면역치료법(adoptive immunotherapy)에 대한 연구가 활성화 되 었다. 그러나 LAK세포 배양상청액의 활성에 관한 연구가 부족하여 확실한 결론을 내리지 못하고 있다. 본 연구는 LAK세포 배양 상청액의 세포독성율 확인하고 LAK세포 유도 배양과 증식배양 에서 얻어진 배양 상청액의 세포독성 확인 및 LAK 세포와 LAK세포 배양 상청액의 활성을 비교하여 두 활성 간의 연관성을 밝히고자, 사람의 정상세포인 섬유아세포와 종양세포주 (HeLa세포, MCF-7 세포)를 이용하여 세포독성을 측정하였다. LAK세포 배양 상청액은 종양세포에 상청액을 노출한 후 4일까지 세포독성이 계속 증가 하였고 그 이후에는 변화가 없었으며 정상세포에 대해서는 영향을 미치지 않았다. LAK세 포의 세포독성은 4일 유도 배양한 경우 보다 증식배양(10일과 13일) 후에 가장 높았다. 그러나 LAK 세포 배양 상청액의 세포독성은 4일간 유도한 상청액이 가장 높았으며 증식배 양에서 얻어진 상청액은 저하되었다. 그러므로 LAK세포와 배양상청액 간의 세포독성은 서 로 다르게 나타났다. 상기의 결과로 LAK세포 배양 상청액의 세포독성은 유도된 LAK세포에서 유래된 것이 아 니라 전구세포가 LAK세포로 분화되는 과정에서 생산되는 것으로 판단된다. [영문] It is well known that lymphokine-activated killer(LAK) cell can destory various types of tumor cells and the fact has been applied to the adoptive immunotherapy of cancers. The antitumor activity of LAK cells has been clarified but the effect of the supernatant of LAK cell culture has no clear conclusion yet. Human fibroblasta from normal cell origin and human tumor cell lines(HeLa cell, MCF-7 cell) were employed to measure and confirm the cytotoxicity of LAK cells and its culture supernatant. The cytotoxicity was measured through induction culture and expansion culture to find out the relationship between the two activites by comparing the activity of LAK cells and its culture supernatant. The cytotoxicity of LAK cell culture supernatant has been increased continuously upto 4 days after exposing LAK cell culture supernatant to tumor cells and since then it appeared as a plateau but there was no effect upon the normal cells. In terms of cytotoxicity the effect of LAK cells were the highest after 10 day- and 13 day- expansion culture compared to 4 day-induction culture. However, cytotoxicity of culture supernatant showed the highest in the 4 day-induced supernatant but the cytotoxicity of the culture supernatant was declined. Apparently the cytotoxicity between LAK cells and culture supernatant was very different. From the results of the above, cytotoxicity of LAK cell culture supernatant was not considered to be originated from induced LAK cells. Possibly it may be originating from the process of LAK cell differentiation.restrictio