Evaluation eines \(\textit {Pseudomonas aeruginosa}\) Real-Time PCR Assays in vitro und im Sputum von Patienten mit Mukoviszidose

Ziel der Arbeit war die Etablierung und Evaluation eines Fluoreszenz-basierten, quantitativen PCR Assays (qPCR) zum Nachweis von \(\textit {Pseudomonas aeruginosa}\). Zur Bestimmung der Sensitivität des PCR Assays wurde die konventionelle Methode der mikrobiologischen Kultur mit der qPCR verglichen. Dabei sind in vitro Monokulturen des Bakteriums und in vivo Sputumproben von Patienten mit Mukoviszidose eingesetzt worden. Der qPCR Assay wies eine hohe Spezifität für \(\textit {P. aeruginosa}\) auf und anhand von Monokulturen konnte eine hundertmal höhere Sensitivität gegenüber der konventionellen Methode aufgezeigt werden. Im Rahmen der klinischen Testung ergaben sich eine Sensitivität von 100 % sowie eine Spezifität von 79 %, verglichen mit der konventionellen Kultur als diagnostischem Standard. Der TaqMan basierte qPCR Assay kann bei Patienten mit Mukoviszidose ein Verfahren zum frühzeitigeren Nachweis einer bakteriellen Besiedelung mit \(\textit {P. aeruginosa}\) in klinischen Sputumproben darstellen