Fatores que influenciam as caracteristicas de amostras de sangue do cordão umbilical

RODRIGUES, Ana Sofia Batalha - Fatores que influenciam as caracteristicas de amostras de sangue do cordão umbilical. Coimbra : [s.n.], 2016. Dissertação de Mestrado em Bioquimica.O sangue do cordão umbilical é uma fonte alternativa de células estaminais hematopoiéticas para utilização clinica no tratamento de várias doenças oncológicas e não-oncológicas. Para que as amostras de sangue do cordão umbilical possam estar disponíveis para pacientes que necessitem de um transplante de células estaminais hematopoiéticas, é necessário armazená-las em bancos de criopreservação. De forma a garantir que as amostras guardadas apresentem as características necessárias para serem utilizadas, é importante otimizar todo o processo desde a colheita até à criopreservação, incluindo o processamento das amostras. Neste trabalho foram analisadas retrospetivamente 8430 amostras de sangue do cordão umbilical no sentido de avaliar a influência de vários fatores neonatais (sexo, peso e idade gestacional do recém-nascido), fatores obstétricos (tipo de parto) e outros fatores (tempo entre a colheita e o processamento, bacteriologia e fase da lua na altura do nascimento) nos parâmetros laboratoriais de amostras de sangue do cordão umbilical antes e após o processamento. Foi também analisada a influência de fatores intrínsecos das amostras aquando da chegada ao laboratório, como a presença de coágulos, o volume, o número de células nucleadas totais, o número de células mononucleadas, o número de eritrócitos e o hematócrito nos parâmetros laboratoriais após o processamento. Adicionalmente, foram comparados dois métodos de processamento de sangue do cordão umbilical, o Sepax® e o AXP®, quanto à sua eficiência no processamento das amostras, nomeadamente nas recuperações celulares e na redução da fração de eritrócitos. As amostras provenientes de recém-nascidos do sexo masculino, com maior peso, bem como com maior idade gestacional e cujo nascimento ocorreu por parto vaginal apresentaram, na generalidade, um aumento dos parâmetros laboratoriais analisados. A redução do intervalo de tempo entre a colheita e o processamento para menos de 48 horas e a diminuição da contaminação microbiológica das amostras poderá também contribuir para a melhoria das características das mesmas. Observou-se também que as amostras colhidas na fase de lua nova apresentaram um maior conteúdo em células CD34+. O volume de sangue do cordão umbilical demonstrou ser o principal fator responsável pelas variações observadas no número total de células. Quanto ao método de processamento, o AXP® foi mais eficiente na recuperação celular e na redução dos eritrócitos comparativamente ao Sepax®.Umbilical cord blood is an alternative source of hematopoietic stem cells for the treatment of several malignant and non-malignant diseases. In order to guarantee that umbilical cord blood samples are available for patients in need of hematopoietic stem cell transplants, samples must be stored in cryopreservation banks. To ensure that stored samples present the required proprieties for use in transplantation, it is mandatory to optimize the process from the collection of the samples to their cryopreservation, including their processing. In the present work, 8430 umbilical cord blood samples were retrospectively analysed to evaluate the influence of several neonatal factors (gender, weight and gestational age), obstetric factors (type of delivery) and other factors (time from collection to processing, bacteriology and lunar phase at time of birth) on the laboratorial parameters of umbilical cord blood samples before and after processing. The influence of intrinsic factors such as volume, number of total nucleated cells, mononuclear cells, erythrocytes and the haematocrit on the laboratorial parameters was also evaluated. Additionally, two umbilical cord blood processing methods were compared, Sepax® and AXP®, to evaluate their efficiency in sample processing, namely on cellular recovery and reduction of the erythrocyte fraction. In general, samples from newborns with higher weight and longer gestational age as well as vaginal deliveries, showed higher laboratorial parameters. Decreasing time from collection to processing for less than 48 hours and reducing microbiology contamination rate could also lead to improved umbilical cord blood characteristics. A higher hematopoietic stem cell content in samples collected at new moon was also observed. Umbilical cord blood volume was showed to be the main factor affecting cell content variations. Regarding the processing method, AXP® was more efficient on cell recovery and erythrocyte reduction than Sepax®