Instabilite des adduits interbrins formes dans la reaction entre le cis-dichlorodiammineplatine (II) et l'ADN

National audienceDans la reaction entre la substance antitumorale cis-dichlorodiammineplatine(II) (cis-DDP) et l'ADN, des adduits bifonctionnels intrabrins majoritaires et des adduits interbrins sont formes. Parmi ces differents adduits, les adduits interbrins seraient responsables de l'activite cytotoxique du produit. Les adduits interbrins se forment entre deux guanines situees sur des brins opposes dans la sequence d(GC/GC). Il est admis que dans cet adduit, la liaison entre le cis-DDP et l'atome N7 des residus guanines est stable et que seuls des agents nucleophiles tres forts tels que les ions cyanures sont capables de la deplacer.Dans notre etude, nous montrons au contraire que dans la double helice d'ADN, l'adduit interbrin est instable dans les conditions physiologiques. L'instabilite de l'adduit interbrin dans des ADN de sequence centrale d(CGCT/ACGCG) est etudiee par electrophorese sur gel de polyacrylamide et par chromatographiee changeuse d'ions. La liberation des deux brins d'ADN non platines et des deux brins d'ADN platines montre que la liaison entre le cis-DDP et l'atome N7 des residus guanines est rompue. Les brins platines liberes sont modifies par un adduit monofonctionnel sur le residu guanine du site d(GC/GC). Lorsque les brins d'ADN ne sont par apparies, l'adduit monofonctionnel se rearrange en un adduit intrabrin. Lorsque les brins d'ADN sont apparies, l'adduit monofonctionnel peut reagir avec le brin complementaire pour donner a nouveau l'adduit interbrin. La reaction de cassure de l'adduit interbrin est alors reversible.La cinetique de l'instabilite de l'adduit interbrin a ete etudiee dans des conditions ou les brins, liberes par la cassure de la liaison entre le cis-DDP et l'atome N7 des residus guanines, ne sont pas apparies ou dans des conditions ou les adduits monofonctionnels sont pieges: le temps de demi-vie est de 29 heuresa 37 o C.Une etude systematique des differents parametres susceptibles d'influer sur l'instabilite de l'adduit interbrin est en cours, en insistant sur l'effet des polymerases pouvant modifier localement les contraintes de la double helice