Diferenciación de cepas de Mycoplasma gallisepticum a partir de RFLP

Avian mycoplasmosis is a disease that considerably affects the poultry sector, which is reflected in the decrease of the production parameters in fertile and commercial egg laying broilers. Presentation costs are so high that it is impossible for the poultry industry to survive without thinking of its effective control or eradication. There is great interest in the type of M. gallisepticum (Mg) strains, both vaccine and field, which are key aspects to handle the disease, but there is still no definitive method for Mg strain characterization. Genes related to surface proteins —gapA and mgc2,lipoprotein (lp)— that make it possible to identify and characterize the Mg genomically are currently being studied. In this study, regions of the lp gene were amplified from strains F and Ts-11 of Mg through the polymerase chain reaction (PCR) technique, which gave an amplicon of 455 bp for each of the strains; each of the amplicons was applied the restriction fragment length polymorphism (RFLP) test with the Taq I enzyme, which made it possible to differentiate vaccine strains from field strains obtained from tracheal swab samples taken at commercial farms. It was demonstrated that PCRRFLP is an appropriate method of diagnosis of mycoplasmosis in our environment.A micoplasmose aviar é uma doença que afeta consideravelmente o setor avícola, isso se reflete na diminuição de parâmetros produtivos em aves de engorde poedeiras de ovo fértil e poedeiras de ovo comercial. Os custos de sua apresentação são tão altos que é impossível a sobrevivência da avicultura industrial sem pensar no controle efetivo ou em sua erradicação. Existe um grande interesse na tipificação de cepas de M. gallisepticum (Mg) tanto vacinais como de campo, aspecto chave para o manejo da doença, mas ainda não existe um método definitivo de caracterização de cepas de Mg. Na atualidade estão sendo estudados genes relacionados com proteínas de superfície —gapA e mgc2, lipoproteína (lp)— que permitam identificar e caracterizar genômicamente ao Mg. No presente estudo se amplificaram regiões do gen lp a partir das cepas F e Ts-11 do Mg pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) que deu um amplicon de 455 pb para cada uma das cepas; a cada um dos amplicons foi feito o teste de polimorfismo de longitude dos fragmentos de restrição (RFLP) com a enzima Taq I, o que permitiu diferenciar cepas vacunais de cepas de campo obtidas a partir de mostras de mostras traqueais tomadas em granjas de exploração comercial. Demonstrou-se que o PCR-RFLP é um método adequado de diagnóstico da micoplasmose em nosso meio.La micoplasmosis aviar es una enfermedad que afecta considerablemente al sector avícola, lo que se ve reflejado en la disminución de parámetros productivos en aves de engorde ponedoras de huevo fértil y ponedoras de huevo comercial. Los costos de su presentación son tan altos que es imposible la supervivencia de la avicultura industrial sin pensar en el control efectivo o en su erradicación. Existe un gran interés en la tipificación de cepas de M. gallisepticum (Mg) tanto vacunales como de campo, aspecto clave para el manejo de la enfermedad, pero aún no existe un método definitivo de caracterización de cepas de Mg. En la actualidad se están estudiando genes relacionados con proteínas de superficie —gapA y mgc2, lipoproteína (lp)— que permitan identificar y caracterizar genómicamente al Mg. En el presente estudio se amplificaron regiones del gen lp a partir de las cepas F y Ts-11 del Mg por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que dio un amplicón de 455 pb para cada una de las cepas; a cada uno de los amplicones se les hizo la prueba de polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) con la enzima Taq I, lo que permitió diferenciar cepas vacunales de cepas de campo obtenidas a partir de muestras de hisopos traqueales tomados en granjas de explotación comercial. Se demostró que el PCR-RFLP es un método adecuado de diagnóstico de la micoplasmosis en nuestro medio