Expressão do gene da interleucina-10 na conjuntivite alérgica canina

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaA conjuntivite alérgica canina (CAc) é uma doença cuja manifestação clínica ocorre nas pálpebras, na conjuntiva e/ou na córnea. Caracteriza-se por reações de hipersensibilidade do tipo I e integra frequentemente a sintomatologia da dermatite atópica canina (DAc). Através do estudo realizado no âmbito da presente dissertação de mestrado, pretende-se contribuir para a caracterização da resposta imunitária da CAc. Nesse sentido, um grupo controlo formado por animais saudáveis (n=10) e um grupo de animais atópicos com conjuntivite alérgica (CA) (n=10) integraram a presente experiência. Ambos foram submetidos a um exame dermatológico e oftalmológico completos, em que se procedeu, apenas para o grupo atópico, à classificação da gravidade das lesões com o Canine Atopic Dermatitis Extent and Severity Index – fourth version (CADESI-4), bem como à avaliação quantitativa dos sinais clínicos de CAc (corrimento ocular, epífora, hiperémia conjuntival, prurido, quemose e queratite concomitante) através da atribuição de um valor entre 0 (ausente) e 3 (grave). Subsequentemente, após a aplicação tópica ocular de anestésico, uma amostra de conjuntiva palpebral medindo cerca de 2x2 mm foi colhida e submetida a quantificação, por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR), dos níveis de expressão de ácido ribonucleico mensageiro (mRNA) do gene da interleucina (IL) -10. A análise estatística foi realizada recorrendo ao teste Mann-Whitney-Wilcoxon e ao teste de correlação de Spearman, sendo que os resultados a seguir apresentados surgem sob a forma de média±desvio-padrão. O score de CADESI-4 nos cães atópicos foi de 22,1±15,72. O score de CA do olho esquerdo foi de 8,9±15,72 e no olho direito 9,1±2,51. A média do score de CA de ambos os olhos foi 9,0±2,30. Os níveis de expressão do gene da IL-10 para o grupo atópico e controlo foram, respetivamente, 0,005±0,0029 e 0,004±0,0024. Verificou-se existir um coeficiente de correlação positivo entre os valores de CADESI-4 e os níveis de expressão do gene da IL-10 (p=0,25), bem como um coeficiente de correlação negativo entre a média do score de CA de ambos os olhos e a expressão do mesmo gene (p=0,35). Desta forma, concluímos que aparentemente o grupo atópico apresenta maiores níveis de expressão do gene da IL-10, o que poderá ser útil para o estudo da fisiopatologia e tratamento de atopia canina e respetiva CA. É necessária a realização de mais estudos para confirmar esta hipótese.ABSTRACT - INTERLEUKIN-10 GENE EXPRESSION IN CANINE ALLERGIC CONJUNCTIVITIS - Canine allergic conjunctivitis (cAC) is a disease whose clinical manifestation occurs in the eyelids, in the conjunctiva and/or in the cornea. It is characterized by type I hypersensitivity reactions and is often included in the symptoms of canine atopic dermatitis (cAD). Through the study under this master thesis we aim to contribute to the characterization of cAC immune response. Therefore, a control group consisting of healthy animals (n=10) and a group of atopic animals with allergic conjunctivitis (AC) (n=10) were enrolled in the present experiment. Both underwent complete dermatological and ophthalmic examinations, which included, only for the atopic group, Canine Atopic Dermatitis Extent and Severity Index – fourth version (CADESI-4) classification of the severity of injuries, as well as the quantitative evaluation of clinical signs of AC (ocular discharge, epiphora, conjunctival hyperemia, pruritus, chemosis and concurrent keratitis) by rating them from 0 (absent) to 3 (severe). Subsequently, after ocular topical anesthesia, a sample of palpebral conjunctiva measuring approximately 2x2 mm was collected and subjected to quantification, by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), of the messenger ribonucleic acid (mRNA) expression levels of interleukin (IL) -10 gene. Statistical analysis was performed using the Mann-Whitney-Wilcoxon test and the Spearman correlation test, results being presented as mean±standard deviation. CADESI-4 score for the atopic group was 22,1±15,72. AC score in the left eye was 8,9±15,72 and in the right eye 9,1±2,51. The average AC score for both eyes corresponded to 9,0±2,30. IL-10 gene expression levels for the atopic and control group were, respectively, 0,005±0,0029 and 0,004±0,0024. There was a positive correlation coefficient between CADESI-4 values and IL-10 gene expression levels (p=0,25), as well as a negative correlation coefficient between the average of the AC score for both eyes and the expression of the same gene (p=0,35). Thus, we concluded that apparently the atopic group has higher IL-10 gene expression levels which may be useful for the study of the physiopathology and treatment of canine atopy and its respective AC. Further studies are required to confirm this hypothesis