Características de sémen canino refrigerado: comparação entre três diluidores diferentes

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaA conservação de sémen e inseminação artificial em cães tem vindo a ser uma prática crescente nos últimos anos. Com a selecção de linhagens de cães para trabalho, desporto e beleza, as trocas de material genético internacionalmente são inevitáveis. A refrigeração de sémen, para inseminação posterior, é o método mais prático e económico de realizar este intercâmbio. No processo de conservação de sémen é imprescindível a adição de diluidores, e um dos componentes mais utilizados, devido às suas características, é a gema de ovo. No entanto, devido aos riscos biológicos associados a este produto, têm surgido restrições do seu uso em alguns países. O objectivo deste estudo foi comparar a capacidade de conservação de sémen de cão proporcionada por três diluidores diferentes, em termos de motilidade, morfologia e integridade da membrana plasmática. Estes parâmetros foram avaliados diariamente, ao longo de 4 dias, em 9 ejaculados. Cada ejaculado foi dividido em três partes, que foram diluídas em diluidores diferentes (tris-gema de ovo, tris-leite 25% ou trisleite 50%) e conservadas a 4 – 5ºC. A motilidade progressiva dos espermatozóides, ao fim dos 4 dias, foi significativamente melhor no diluidor tris-gema de ovo (54,7%) do que no tris-leite 25% (43,8%) ou no tris-leite 50% (40,4%). Em relação à percentagem de espermatozóides vivos e normais, foi também o diluidor tris-gema de ovo que apresentou melhores resultados (75,8%), comparativamente ao diluidor tris-leite 25% (66,2%) e tris-leite 50% (67,1%), sendo esta diferença significativa. A avaliação da integridade da membrana plasmática dos espermatozóides foi realizada por intermédio do teste hipo-osmótico, não se tendo verificado diferenças significativas entre diluidores. O diluidor tris-gema de ovo aparenta ser superior aos outros diluidores testados, na conservação de sémen de cão durante a refrigeração. No entanto, o diluidor tris-leite (numa concentração entre 25% a 50% v/v) também apresentou bons resultados, demonstrando ser um potencial substituto nos casos de envio de sémen para países em que a entrada de componentes de ovo está interdita.ABSTRACT - Properties of chilled canine semen – comparison of three different extenders - Semen preservation and artificial insemination in dogs has become a common practice in the last years. With breeding selection for work, sports and beauty, the international exchange of genetic material are inevitable. In these cases, the use of chilled semen for artificial insemination is the most economical and practical method for doing it. Chilled semen preservation needs the addition of extenders, being egg yolk one of the components most used. However, since it can be a biologic hazards, several countries have imposed restrictions of its use. The aim of this study was to compare three different extenders in terms of their effects on canine spermatozoa, as judged by characteristics such as motility, morphology and plasma membrane integrity. These parameters were assessed daily over 4 days in 9 ejaculates. Each ejaculate was divided into three parts, which were extended in different extenders (egg-yolk-tris, milk-tris 25% and milk-tris 50%) and stored at 4 – 5 ºC. The progressive motility of spermatozoa on the fourth day was significantly higher in eggyolk- tris (54,7%) than in milk-tris 25% (42,8%) or in milk-tris 50% (40,4%). At the end of four days, the percentage of live and normal sperm was also significantly higher in the egg-yolktris extender (75.8%) than in milk-tris 25% (66.2%) and in milk-tris 50% (67.1%). The evaluation of plasma membrane integrity of spermatozoa was determined by hypo-osmotic test, and there were no significant differences between extenders. The egg-yok-tris extender seems to be superior to the other extenders tested, in preservation of dog semen at 4ºC. However, the milk-tris extender (in a concentration (v/v) between 25% and 50%) also showed good results, providing to be a potential substitute in cases of shipment of semen to countries where the entry of egg components is forbidden