In vitro Effekt transgener Fibroblasten auf Spiralganglienzellen neonataler Ratten

Der optimale Nutzen, der mit einem Cochlea Implantat erzielt werden kann, zeigt eine Abhängigkeit von der Anzahl vitaler Spiralganglienzellen (SGC). In dieser Studie sollte die Hypothese überprüft werden, ob "brain derived neurotrophic factor" (BDNF) produzierende transgene Fibroblasten eine gesteigerte Überlebensrate von SGC bewirken können. Murine NIH-3T3 Fibroblasten wurden mittels eines lentiviralen Vectorsystems transfiziert. Die entstandene Zellinie exprimiert BDNF und "green fluorescent protein" als Marker. Aus den Cochleae neonataler Ratten wurden die SGC-Stränge entnommen und nach Vereinzelung für 52 Stunden in Kultur gebracht. Die SGC wurden im serumhaltigen Kulturüberstand, der von transgenen Fibroblasten sezerniertes BDNF enthielt, kultiviert. Als Negativkontrolle dienten in serumfreiem und serumhaltigem DMEM-Medium kultivierte SGC. Parallel dazu wurden diese drei Versuchsgruppen zum Erhalt einer Positivkontrolle mit externem BDNF komplementiert. Mit BDNF behandelte SGC zeigten gegenüber der in serumfreiem und serumhaltigem DMEM-Medium kultivierten SGC erhöhte Überlebensraten. Ähnliche Überlebensraten wurden auch bei SGC erzielt, die in serumhaltigem DMEM-Medium mit externem BDNF kultiviert wurden. Die längsten Neuriten wurden an den in serumhaltigem Kulturüberstand kultivierten SGC nachgewiesen. Die Ergebnisse zeigen, dass transgene Fibroblasten in vitro biologisch aktives BDNF produzieren, das die Überlebensrate der SGC erhöht und Neuritenaussprossung induziert.Unterstützt durch: DFG-SFB 59