Análise estereológica de núcleos hipotalâmicos envolvidos com a regulação da ingestão alimentar em ratos Wistar submetidos a tratamento imunossupressor com tacrolimus e micofenolato mofetil

Orientador: Prof. Dr. Jorge Eduardo Fouto MatiasCoorientadora: Profª. Drª. Djanira Aparecida da Luz VeronezDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 18/12/2017Inclui referências: f. 55-60Resumo: Drogas imunossupressoras são indispensáveis para pacientes pós-transplante, diminuindo, significativamente, os riscos de rejeição inerentes à este tipo de procedimento. No entanto, seus efeitos colaterais sobre os núcleos hipotalâmicos envolvidos na regulação da ingestão de alimentos e o efeito no excessivo ganho de peso e suas comorbidades associadas são desconhecidos. Neste sentido, esta pesquisa teve como objetivo desenvolver a análise estereológica dos núcleos hipotalâmicos relacionados com a ingestão de alimentos em ratos Wistar submetidos ao tratamento com os imunossupressores tacrolimus (TAC) ou micofenolato mofetil (MMF), comparar a densidade neuronal e número total de neurônios hipotalâmicos entre ratos Wistar tratados com imunossupressores e com isso observar possíveis alterações nos núcleos hipotalâmicos paraventricular, área hipotalâmica lateral, dorsomedial, ventromedial e arqueado. O estudo experimental foi realizado em ratos Wistar machos submetidos ao tratamento das drogas imunossupressoras TAC e MMF, via oral, durante o período de 14 semanas. Os animais foram randomicamente categorizados em quatro grupos: Controle (sem administração da droga); Sham (administração de soro fisiológico (SF) 0,9%, via gavagem); Tacrolimus (administração de 1mg/kg ao dia de tacrolimus diluídos em SF 0,9%, via gavagem) e Micofenolato (administração de 30mg/kg ao dia de micofenolato mofetil diluídos em SF 0,9%, via gavagem). Após o período de tratamento imunossupressor, os animais foram eutanasiados e seus encéfalos fixados para posterior confecção de lâminas histológicas utilizando a coloração de Nissl. Essas lâminas foram fotodocumentadas e as imagens obtidas receberam "máscaras" delimitantes para posterior implantação do dissector físico para quantificação e análise estereológica dos corpos celulares dos neurônios hipotalâmicos. Não houve diferenças significativas nas densidades neuronais e nos números de neurônios hipotalâmicos dos núcleos paraventricular, área hipotalâmica lateral, dorsomedial, ventromedial e arqueado entre os grupos Controle, Sham, Tacrolimus e Micofenolato. Neste estudo, o tratamento de animais com imunossupressores TAC e MMF por 14 semanas não induziu alterações no número dos corpos celulares dos neurônios hipotalâmicos e não evidenciaram efeitos neurotóxicos dos imunossupressores TAC e MMF. Estudos complementares serão necessários para elucidar a atuação dos imunossopressores TAC e MMF no hipotálamo. Palavras Chave: Transplante. Obesidade. Imunossupressores. Tacrolimus. Ácido Micofenólico. Hipotálamo. Ratos Wistar. Amostragem Aleatória e Sistemática.Abstract: Immunosuppressive drugs are indispensable to post-transplant patients for significantly reducing the inherent risks of graft rejection related to the procedure. However, the side effects on the hypothalamic nuclei responsible for regulation of food intake and the effect on excessive weight gain and the related complications are unknown. Therefore, this research aimed to perform stereological analysis of the hypothalamic nuclei related to food intake in Wistar rats submitted to immunosupressive treatment with tacrolimus (TAC) or mycophenolate mofetil (MMF) in order to compare neuronal density and total number of neurons in the hypothalamic paraventricular, lateral hypothalamic area, dorsomedial, ventromedial and arched. The experimental study was performed in male Wistar rats submitted to immunosuppressive treatment with TAC or MMF, orally, during a 14-week period. The animals were randomly categorized into four groups: Control (no drug administration); Sham (0.9% saline solution administration, by gavage); Tacrolimus (administration of 1mg/kg/day of tacrolimus diluted in 0.9% saline solution by gavage) and Mycophenolate (administration of 30mg/kg/day of mycophenolate mofetil diluted in 0.9% saline solution by gavage). After the immunosuppressive treatment, animals were euthanized and their brains fixed for subsequent histological slides using Nissl staining. These slides were photodocumented and the images obtained received delimiting "masks" for later implantation of the physical dissector to quantify and stereologically analyze the cellular bodies of the hypothalamic neurons. There were no significant differences in neuronal densities and numbers of hypothalamic neurons of the paraventricular nuclei, lateral hypothalamic area, dorsomedial, ventromedial and arched between the Control, Sham, Tacrolimus and Mycophenolate groups. In this study, the experimental treatment with immunosuppressive CT or MMF for 14 weeks did not induce changes in the number of cell bodies of hypothalamic neurons and did not show neurotoxic effects of the used immunosuppressant agents. Additional studies will be needed to elucidate the performance of the immunosuppressants CT and MMF in the hypothalamus. Keywords: Transplantation. Obesity. Immunossupressive Agents. Tacrolimus. Mycophenolic Acid. Hypothalamus. Rats, Wistar. Random and Systematic Sampling