Investigação dos efeitos da associação do óleo de peixe e metformina em camundongos com obesidade-induzida pela dieta

Orientador : Prof. Dr. Luiz Cláudio FernandesTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 19/11/2013Inclui referênciasResumo: Obesidade e resistência à insulina são condições que apresentam como fator-chave o desenvolvimento do processo inflamatório. Dietas ricas em gordura saturada e/ou carboidratos de alto índice glicêmico promovem efeitos obesogênico e indutor de resistência à insulina. AGPI n-3 possui efeito antiaterogênico, antiinflamatório e sensibilizador à insulina. Metformina representa fármaco amplamente utilizado no tratamento da diabetes e é sensibilizador à insulina. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se a suplementação com óleo de peixe e o tratamento com metformina são capazes de reverter resistência à insulina pré-estabelecida. Camundongos com seis semanas de idade foram alimentados com ração regular (R), hiperlipídica (HFD) ou rica em carboidratos (C) por período de 8 semanas para indução de obesidade e resistência à insulina. Após, foram divididos em 8 grupos: ração regular (R), ração regular suplementado com óleo de peixe (ROP), ração rica em carboidrato (C), ração rica em carboidrato suplementado com óleo de peixe (COP), ração hiperlipídica (HFD), ração hiperlipídica suplementado com óleo de peixe (HOP), ração hiperlipídica com administração de metformina (HFDMET) e ração hiperlipídica suplementado com óleo de peixe mais administração de metformina (HOPMET). Os respectivos tratamentos ocorreram por período de 4 semanas. Após 8 semanas, os grupos C e HFD desenvolveram ganho excessivo de massa corporal. O grupo HFD ainda foi intolerante à glicose. Óleo de peixe em associação com metformina não foi capaz de reverter estado de resistência à insulina, entretanto o grupo HFDMET apresentou redução da hiperinsulinemia. Os grupos HFD e C apresentaram aumento na taxa lipolítica basal, enquanto o grupo HFD mostrou menor resposta lipolítica frente ao estímulo com adrenalina. Acúmulo de lipídios hepáticos (triacilglicerol e colesterol) foi observado no grupo C, enquanto no grupo HFD ocorreu depósito somente de triacilglicerol, além de acúmulo de glicogênio hepático. Óleo de peixe (HOP), isoladamente foi capaz de reduzir a concentração plasmática de TNF-?, mas não em associação com metformina. Adiponectina foi aumentada pela associação de óleo de peixe com metformina (HOPMET). Infiltração de linfócitos T CD4 foi aumentada por óleo de peixe (ROP), acompanhada de redução na razão CD4/CD8, no tecido adiposo epididimal. Ração hiperlipídica (HFD) resultou em redução no número de linfócitos T CD4, no tecido adiposo retroperitoneal. Óleo de peixe isoladamente (HOP) foi capaz de aumentar macrófagos positivos para CD11c, bem como aumentar a razão CD11c/CD206 no tecido adiposo epididimal. A associação de óleo de peixe e metformina (HOPMET) também resultou em aumento no número de macrófagos positivos para CD11c, bem como a razão CD11c/CD206 no tecido adiposo epididimal. Incorporação de EPA e DHA foi melhor no tecido adiposo epididimal do grupo ROP quando comparado à dos grupos COP e HOP. Assim, óleo de peixe isoladamente ou em associação com metformina não foi capaz de reverter resistência à insulina pré-estabelecida.Abstract: Obesity and insulin resistance are conditions that present the inflammatory process as a key factor. High fat and/or high glycemic index carbohydrate diets promote obesogenic effects and induce insulin resistance. N-3 PUFA has anti-atherogenic, anti-inflammatory and insulin sensitizing effects. Metformin has been widely used for the treatment of diabetes and acts as an insulin sensitizer. The objective of this study was to evaluated whether fish oil supplementation and metformin treatment are able to reverse preexisting insulin resistance. Six weeks old mice were fed with regular (R), high fat (HFD) or high carbohydrate (C) for 8 weeks to induce obesity and insulin resistance. Animals were divided into 8 groups: regular diet (R), regular diet supplemented with fish oil (ROP), high carbohydrate diet (C), high carbohydrate supplemented with fish oil (COP), high fat diet (HFD), high fat diet supplemented with fish oil (HOP), high fat diet treated with metformin (HFDMET) and high fat diet supplemented with fish oil and treated with metformin (HOPMET). The respective treatments lasted 4 weeks. After 8 weeks, C and HFD group developed excessive gain body mass. The HFD group was glucose intolerant. Fish oil in association with metformin were not able to reverse insulin resistance, however HFDMET group reduced hyperinsulinemia. C and HFD groups showed an increase in lipolytic basal rate, while HFD group demonstrated lower lipolytic response to epinephrine stimulation. Hepatic lipids accumulation (triacylglycerol and cholesterol) was observed in C group while HFD group only demonstrated triacylglycerol deposit and hepatic glycogen accumulation. Fish oil (HOP) was able to reduce plasma TNF-? concentration but not in combination with metformin. Adiponectin was increased by the combination of fish oil with metformin (HOPMET). T CD4 lymphocytes infiltration was increased by fish oil (ROP) accompanied by a reduction in the CD4/CD8 ratio in epididymal adipose tissue. High fat diet resulted in a reduction in T CD4 lymphocytes in retroperitoneal adipose tissue. Fish oil alone (HOP) was able to increase macrophages CD11c positives and increased CD11c/CD206 ratio in epididymal adipose tissue. Fish oil and metformin association also increased CD11c macrophages, as well CD11c/CD206 ratio in epididymal adipose tissue. EPA and DHA incorporation in ROP group was higher when compared to COP and HOP groups in epididymal adipose tissue. Thus, fish oil alone or in association with metformin was not able to reverse preexisting insulin resistance