Implantação da tecnica de detecção de anticorpos antiilhota pancreatica e sua aplicação em pacientes e irmãos de pacientes com diabetes mellitus tipo I

Orientador: Ricardo PasquiniCo-orientador: Luis Fernando Bleggi TorresDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias da SaudeResumo: Desde a primeira descrição dos anticorpos citoplasmáticos contra células da ilhota (ICAs) em pacientes com diabetes tipo I, estes marcadores humorais vem sendo progressivamente mais utilizados em investigação clínica. No presente estudo, um método para detecção dos ICAs foi implantado no Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. Os anticorpos foram determinados de acordo com um protocolo padrão, baseado na técnica convencional de imunofluorescência indireta, em cortes de pâncreas humano realizados em criostato. ICAs foram primeiramente pesquisados pesquisando-se 5 pâncreas diferentes e 10 amostras de soro. Através da comparação dos resultados com aqueles obtidos na Universidade de Minnesota, um dos pâncreas foi selecionado para ser usado na segunda parte do estudo. Uma curva padrão foi construída, baseada no título final de diluição obtido neste mesmo pâncreas para diferentes diluições do soro internacional de referência, possibilitando a expressão dos resultados em unidades JDF (Juvenile Diabetes Foundation). A prevalência dos ICAs foi então determinada em cinqüenta crianças e jovens com diabetes tipo I recémdiagnosticado e em 40 irmãos não-afetados de pacientes com diabetes tipo I. A porcentagem encontrada de pacientes com ICAs na instalação do diabetes (66%) se encontra dentro da variação descrita por outros (50-84%). A freqüência relativamente alta de ICAs no grupo de irmãos (5%) exige testes futuros em um número maior de pessoas, com acompanhamento rigoroso.Abstract: Since the first description of cytoplasmic islet cell antibodies (ICA) in type I diabetic patients, these humoral markers have been increasingly applied in clinical investigations. In this study, a method for ICA detection was established at the Hospital de Clínicas of the Universidade Federal do Paraná. These antibodies were determined according to a standard protocol based on the conventional indirect immunofluorescence technique, on cryostat sections of human pancreas. ICA were first determined using 5 different pancreata and 10 serum samples. By comparison of results with those obtained at the University of Minnesota, one of the pancreas was selected to be used in the second part of the study. A standard curve was constructed based on end-point titers obtained on this very pancreas for different dilutions of the international reference serum, making it possible to express the results in JDF (Juvenile Diabetes Foundation) units. The prevalence of ICA was then studied in 50 newly diagnosed children and juveniles with type I diabetes, and in 40 unaffected siblings of type I diabetic patients. The percentage of patients with ICA at the onset of the disease (66%) was within the range reported by others (50-84%). The relatively high frequency of ICA in the group of siblings (5%) demands further testing in a greater number of persons, and close follow-u