Caracterização da expressão de genes da via de reparo do DNA FA-BRCA e do gene MTAP em carcinomas mamários

Resumo: No Brasil os carcinomas mamários são os mais comuns entre as mulheres. O câncer de mama é uma doença heterogênea, cuja classificação é baseada na morfologia celular e na presença de receptores específicos. Esta classificação é útil na predição do prognóstico e no direcionamento do tratamento, e permitiu o desenvolvimento de terapias adjuvantes atualmente em uso na clínica. Estudos revelaram a presença de cinco subtipos intrínsecos de câncer de mama, quanto ao padrão de expressão gênica e às alterações genéticas: luminal-A, luminal-B, normal-like, ERBB2+ e basallike (incluindo-se aqui os tumores triplo negativos -TNBC). Considerando estes padrões de expressão, novas estratégias terapêuticas têm sido sugeridas. A análise da expressão de genes envolvidos nas vias de reparo do DNA e de outros genes importantes ao metabolismo celular, apresenta relevância clínica e para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. O objetivo principal do trabalho foi analisar a expressão de genes da via de reparo do DNA FA-BRCA, e do gene MTAP, propondo novas possibilidades terapêuticas em câncer de mama de acordo com o comportamento destes genes em diferentes subtipos tumorais. Foram utilizadas 46 amostras não-parafinizadas de carcinomas primários da mama, dez amostras não-parafinizadas de tecido não-tumoral da mama contralateral, 85 amostras paranifizadas de tumores de mama TNBC, 66 amostras parafinizadas de tumores de mama do grupo Luminal-A e sete linhagens celulares de carcinomas mamários. O gene FANCD2 foi aproximadamente duas vezes mais expresso no grupo tumoral (36) em relação ao grupo não-tumoral (10), quando se analisou um grupo de carcinomas ductais invasores. As amostras não-parafinizadas foram também classificadas conforme os subtipos intrínsecos do câncer de mama. O gene BRCA1 foi aproximadamente três vezes menos expresso no grupo Luminal-B (14) em relação ao grupo Luminal-A (23). Nas amostras parafinizadas, o gene MTAP se mostrou aproximadamente duas vezes menos expresso no grupo TNBC (85) em relação ao grupo Luminal-A (66). MTAP foi inativado em uma linhagem celular que expressa o gene, e foram realizados ensaios citotóxicos com fármacos que interferem na via da biossíntese de poliaminas. As células MTAP-negativas apresentaram maior sensibilidade ao fármaco 5'- fluorouracil (5'-FU) em relação às células MTAP-positivas. O aumento da expressão gênica de FANCD2 no grupo tumoral pode ser um indicador da ativação da via, o que contribui para o processo carcinogênico, e também já foi correlacionado com a resistência à ciclofosfamida e outros quimioterápicos. A redução da expressão de BRCA1 no grupo Luminal-B é considerada um indicador para a escolha de terapias adjuvantes baseadas em cisplatina, e para que tratamentos baseados em taxóis sejam evitados, devido ao maior risco de resistência. Tumores com expressão reduzida de MTAP, como o grupo TNBC, são mais sensíveis a inibidores da síntese de poliaminas, como o 5'- FU. Nossos resultados corroboram um esquema terapêutico proposto recentemente para tumores MTAP-negativos, baseado no uso de análogos de poliaminas e do substato MTA, sugerindo novas possibilidades terapêuticas para pacientes TNBC. O padrão de expressão dos genes FANCD2, BRCA1 e MTAP apresenta forte relevância clínica, influenciando a resposta a diversos fármacos, e também atuando como novos alvos terapêuticos no câncer de mama