Suplementação nutricional com glutamina na vigência de colite induzida em ratos wistar

Orientador: João Carlos Domingues RepkaFalta a página 19 em todos os exemplaresTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da SaúdeResumo: A glutamina é um aminoácido não essencial, mas componente necessário para a síntese de proteínas e nucleotídeos, sob a condição de substrato energético para células de proliferação rápida como fibroblastos, linfócitos, enterócitos e colonócitos, e ainda ao transporte de nitrogênio e amónia para o fígado e rins. Este estudo investiga o efeito da suplementação com glutamina, sobre o tecido colônico na colite induzida com ácido acético a 10% em ratos Wistar, avaliado através da determinação do azul de Evans tecidual e histologia. Hipotetizamos que a suplementação acelera o reparo da mucosa colônica neste modelo experimental de processo inflamatório. Para tanto, estudaram-se 34 ratos, machos da linhagem Wistar-Tecpar com pesos compreendidos entre 239,4 g e 330,2 g, divididos em quatro grupos. Grupo I: (n=6) os ratos receberam 30 mg de glutamina intragástrica desde 7 dias antes da indução até o dia do sacrifício. Grupo II: (n=8) a glutamina foi administrada durante 7 dias antes da indução e posteriormente suspensa. Grupo III: (n=10) os animais receberam a suplementação com glutamina a partir do dia da indução da colite até o sacrifício. Grupo IV: (n=10) considerado o grupo controle recebeu solução salina a 0,9 % antes e após indução até o sacrifício. Todos os ratos foram anestesiados diariamente com éter sulíurico para inoculação intragástrica, tanto da solução de glutamina como a fisiológica. No 7o dia pós-indução e 8 h antes do sacrifício, os animais foram inoculados com azul de Evans a 2,5 %, na dose de 20 mg/kg. Após o sacrifício com inalação letal de éter sulíurico, foram obtidos fragmentos colônicos para a determinação do azul de Evans tecidual, e avaliação histológica. Os valores médios das dosagens do azul de Evans dos fragmentos colônicos, obtidos por espectrofotometria, foram: grupo I 44,45 jag/g; grupo II 48,31 |ig/g; grupo III 33,76 jig/g e grupo IV 65,14 fxg/g. Os resultados das medianas da avaliação histológica foram: grupo I 5; grupo II 15; grupo III 0 e grupo IV 20 Houve diferença significativa entre as médias das concentrações do azul de Evans dos grupos I, II e III comparados com o controle, e quando comparados os valores dos grupos I e II com o III. A melhora histológica dos grupos I e II não foi significativa quando comparada com o controle. Observou-se melhora estatisticamente significativa quando comparado o grupo III com o IV, e III com o II. Estes resultados permitiram concluir que a suplementação com glutamina acelerou o reparo da mucosa colônica, verificado através da melhora estatisticamente significativa dos parâmetros estudados, quando a suplementação com glutamina iniciou-se após a indução do processo processo inflamatório. Este estudo evidencia a importância da GLN como componente essencial após injúria colônica, acelerando o processo de restauração da mucosa.Abstract: Glutamine is classified as a non essential aminoacid, which mislead and underestimated its importance as an indispensable nutrient in times of critical illness. Glutamine has multiple functions, one of the most important of which is as a vehicle for the transfer of nitrogen between tissues. In addition glutamine is a regulator of protein synthesis, the most important substrate for renal ammoniagenesis, and an essential precursor for nucleic acid biosynthesis in all cells. It is a key fuel for the intestinal mucosa and other rapidly dividing cells such as fibroblasts, vascular endothelial cells and lymphocytes. The aim of this study is to evaluate the effects of glutamine on Evans blue concentration and histology of colonic tissue, after acetic acid induced colitis. Thirty four male, adults, Wistar-Tecpar rats weighing between 239,4 g and 330,2 g, were used for experiments. There were randomized to four groups of ten animals each. Glutamine was administered intra-gastricaly in a daily dose of 30 mg. Group I: (n=6) glutamine was administered seven days before colitis induction and after, until sacrifice. Group II: (n=8) animals of this group received glutamine seven days before induction and after that, glutamine free diet. Group III: (n=10) received glutamine since the moment of colitis induction until sacrifice. Group IV: (n=10) known as control group, received saline solution throughout all experiment period of time. Rats were also allowed ad libitum intake of standard rat chow and water. Animals were under light anesthesia for intra-gastricaly feeding. At the 7th postinduction day, and 8h before sacrifice, rats were inoculated intravenously with 20 mg/kg of Evans blue dye. Overdose of inhalatory ether was used to kill animals. A midline incision was made and 3 cm of distal colon removed for Evans blue espectrofotometric determination and histological evaluation. The mean values of Evans blue in colonic tissue were for group I: 44,34 ng/g; group II: 48,31 ng/g; group III: 33,76 (ig/g and for group IV: 46,89 fig/g.The median values of histological numerical score were for group I: 5; group II: 15; group III: 0 and for group IV: 20. There was a statistically significant difference between the mean values of Evans blue colonic concentration o f groups I, II and III when compared to control, and also significant when compared group I and II to III. A statistically significant improvement was found at the histological patterns of group III when compared to control, and also significant differences when compared group II to group III. The most significant benefits of glutamine supplementation were demonstrated when administered after induction of colitis. The current study demonstrates that glutamine may be an essential dietary component after colonic damage when repair is necessary, accelerating mucosal healing