Análise da expressão dos genes BRCA1 e FHIT em carcinomas mamários

Orientadora : Profa. Dra. Enilze Maria de Souza Fonseca RibeiroCo-Orientador: Prof. Dr. Iglenir João CavalliTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 28/02/2011Bibliografia: fls.72-87Resumo: Em todo o mundo mais de um milhão de mulheres são diagnosticadas com câncer de mama por ano, e 410.000 vão a óbito em decorrência desta doença, representando 14% dos óbitos de mulheres por câncer. Análises de perda de heterozigose (LOH) em tumores mamários esporádicos têm indicado perdas alélicas frequentes nos locos 17q21 e 3p14, onde estão localizados os genes BRCA1 e FHIT, respectivamente. A redução nos níveis de expressão destes genes também tem sido descrita, e está associada a parâmetros de pior prognóstico no câncer de mama. Embora algumas interações dos produtos destes genes sejam conhecidas, são necessários mais estudos que avaliem a relação entre essas interações nos níveis genômico e de expressão. Com o objetivo de caracterizar a expressão dos genes BRCA1 e FHIT e sua relação com a presença ou ausência de LOH, parâmetros histopatológicos e de evolução clínica, foram avaliadas 47 pacientes portadoras de tumores mamários esporádicos com perfil de LOH estabelecido. As médias da expressão gênica relativa foram determinadas através de qRT-PCR utilizando o método do Cq comparativo. O gene FHIT apresentou média de expressão (0,0299+0,0377, n = 44) aproximadamente três vezes maior do que a do gene BRCA1 (0,0099+0,0054, n=35) ( t’= 3,428 > tc = 2,027). As médias de expressão dos genes apresentaram correlação significativa (r=0,65; p tc=2,13). Estes dados sugerem uma relação entre os genes que, conforme descrito na literatura, desempenham uma função importante nos processos de gênese e progressão tumoral. Devido as suas conhecidas atuações na regulação do reparo de danos no DNA e no controle da apoptose, alterações na expressão destes genes têm implicações nos parâmetros de pior prognóstico nos cânceres mamários. A regulação dos promotores através de metilação e/ou da ligação de fatores de transcrição e a possível contaminação das amostras com células não tumorais adjacentes podem explicar a ausência de correspondência entre LOH e a expressão gênica.Abstract: Worldwide over one million of women are diagnosed with breast cancer each year and 410,000 will die due to this disease. This represents 14% of female deaths from cancer. Analysis of loss of heterozygosity (LOH) in sporadic breast tumors have shown frequent allelic losses at loci 17q21 and 3p14, where the BRCA1 and FHIT genes are located, respectively. Lower levels of protein expression of these genes have also been described, in association with poor prognosis parameters in these tumors. Although some interactions of the products of these genes are known, further studies are necessary to assess the correlation among these interactions at the genomic, mRNA and protein levels. To characterize the mRNA expression of BRCA1 and FHIT and their correlation with the presence or absence of LOH, histopathological parameters and clinical outcome, we evaluated 47 sporadic breast cancer patients with an established LOH profile. The relative gene expression was determined by qRT-PCR using the Cq comparative method. The gene expression levels of both genes were significantly correlated (r=0.65, p tc=2.13). These data suggest a correlation among the genes and support the important role that they play in the processes of genesis and tumor progression. Due to their function in the regulation of DNA damage repair and cell death, changes in their expression directly affect breast cancer prognosis. The regulation of the promoter of the genes by methylation and/or binding of transcription factors, and the possible contamination of samples with adjacent non-tumor cells, may explain the absence of correlation between LOH and gene expression