Potencial anti-melanoma de complexos imunomodulatórios homeopáticos

Orientador: Edvaldo da Silva TrindadeCo-orintadora: Dorly de Freitas BuchiDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 27/07/2009Inclui bibliografia e anexoÁrea de concentração: Biologia Celular e MolecularO melanoma é a forma mais agressiva de câncer de pele e que se expande mais rapidamente em termos de incidência mundial. A terapia convencional tem demonstrado freqüente ineficiência associada a efeitos adversos em casos de melanoma maligno. Estudos prévios em camundongo demonstraram que complexos altamente diluídos derivados de extratos naturais, ativaram macrófagos, aumentando a produção de óxido nítrico, aumenta o número de células CD45R+ de medula óssea, o número de células CD8+ de linfonodo mesentérico e aumentaram a resposta tumoricida de linfócitos ativados contra células de melanoma murino B16F10 in vitro. Neste estudo foram realizados ensaios de triagem para avaliar o tratamento com diferentes complexos sob: a influencia imunológica do tratamento em camundongos suíços albinos, teste de expressão de interferon em linhagem celular repórter (MxRage), e teste de atividade de pNF-kB em linhagem de adenocarcinoma coloretal transfectada com GFP (HT29). Após os ensaios preliminares de triagem dois complexos foram selecionados para os estudos seguintes para avaliar: o comportamento de células B16F10 após tratamento in vitro e posterior comportamento da propagação de metástases pulmonares em camundongos C57BL/6 após inoculação com células B16F10 por veia caudal e tratamento in vivo por via inalante. Os resultados mostraram inibição in vitro da invasão de células B16F10 e in vivo potencial antimetastático dos complexos derivados de Calcarea carbonica (M8) e de Chelidonium majus. O tratamento mostrou funções como antagonista da expressão do perlecan, inibidor da adesão e invasão celular, a diminuição da ativação do NF-kB induzida por TNF-alfa associada ao aumento da morte celular em células HT2. O perlecan é um importante componente da matriz extracelular e é considerado um fator metastático, angiogênico e de invasão em células tumorais em especial no melanoma. Estes resultados mostraram que compostos seguramente não tóxicos podem ser uma eficiente forma de terapia complementar promissora para a complementação de tratamento de melanoma e outros cânceres por promover a eficiência dos tratamentos convencionais, ou por melhorar a resposta imunológica contra tumores, ou suprimir fatores envolvidos com o comportamento maligno em células tumorais.Melanoma is the most aggressive form of skin cancer, and the most rapidly expanding cancer in terms of worldwide incidence. Chemotherapeutic approaches to treat melanoma have been uniformly disappointing and induce adverse effects. Previous studies in mice have demonstrated that a high diluted complex derivates from natural extracts activated macrophages, increased nitric oxide production, increased the number of CD45R+ cells in bone marrow and CD8+ cells in mesenteric lymph node, and stimulated the tumoricidal response of activated lymphocytes against B16F10 melanoma cells in vitro. Here we performed screening assays to evaluate the immunogical influence of treatment with different complexes in swiss albine mice, to test interferon activity in a reporter cell line (MxRage), and to test pNF-kB activity in a GFP transfected adenocarcinoma colorectal cell line (HT29). After the preliminary screening, two composts were selected to the further study of in vitro function evaluation of treated murine melanoma cells (B16F10) and the posterior in vivo evaluation of the inhalant treatment in a lung metastasis model with B16F10 in C57BL/6 mice. The results showed an in vitro inhibition of invasion associated with adhesion of B16F10 cells in the invasion assay and the in vivo anti-metastatic potential of a Calcarea carbonica (M8) and a Chelidonium majus derivate HDCs after inhalation treatment in the B16F10 lung metastasis model. Treatment showed functions, as a perlecan expression antagonist, inhibitor of cancer cell adhesion and invasion, decrease of NF-kB activation induced by TNF-alfa and increased cell dead were detected. Perlecan is an important component of extracellular matrix and is considered a metastatic, angiogenic and invasive factor for tumor cells, in special melanoma cells. These results showed that a safety, non-toxic and efficacy complementary therapy is possible and these high diluted compounds are a promising alternative approach to the complementary treatment of melanoma, or others cancers, which may enhance the efficacy of conventional medicines by improving the immune response against tumor cells or even inducing a direct dormancy in tumor cells