Avaliação do potencial antimicrobiano de Eugenia pyriformis Cambess., Myrtaceae e estudo da associação sinérgica com agentes antibacterianos e antifúngicos de uso clínico

Orientadora: Profa. Dra. Marilis Dallarmi MiguelCo-orientador: Prof. Dr. Obdúlio Gomes MiguelDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmaceuticas. Defesa: Curitiba, 11/09/2013Bibliografia: fls. 105-117Resumo: A espécie Eugenia pyriformis Cambess., Myrtaceae, conhecida pelo nome popular de uvaia foi avaliada quanto à atividade antimicrobiana de seus extratos, frações e compostos isolados das folhas e caules e seu potencial sinérgico com agentes antimicrobianos de uso clínico. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelas técnicas da bioautografia e da microdiluição em caldo para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) contra cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Candida abicans ATCC 40175, Candida krusei ATCC 40147 e Candida parapsilosis ATCC 40038. Ao avaliar a atividade antibacteriana dos grupos testados pela técnica da microdiluição em caldo foi observado que a fração do extrato acetônico do caule e da folha, as frações hidroalcoólica e acetato de etila das folhas mostraram um bom potencial inibitório contra os micro-organismos Gram-positivos. A análise da atividade antifúngica demonstrou um bom potencial inibitório para os extratos brutos e extratos acetônicos com valores de CIM oscilando entre 7,81 e 62,5 ?g/mL. A fração acetato de etila apresentou bom potencial inibitório somente para a folha, com CIM entre 31,25 e 62,5 ?g/mL. Os compostos isolados não apresentaram atividade antimicrobiana para os micro-organismos testados. A técnica da bioautografia revelou amostras com presença de atividade inibitória que contrastam com os resultados obtidos na determinação da CIM. Os resultados obtidos pela técnica da bioautografia mostram halos de inibição de crescimento em todas as amostras de extratos, frações e compostos isolados de E. pyriformis contra os micro-organismos Gram-positivos testados. Para as frações hexano e clorofórmio de caule e a fração hidroalcoólica de folha também foram observados halos de inibição contra C. albicans. Estas amostras não mostraram atividade antimicrobiana pela técnica da microdiluição em caldo nas CIMs analisadas. O estudo do potencial sinérgico de E. pyriformis foi realizado pela técnica Checkerboard para a determinação do Índice de Concentração Inibitória Fracionada (FICI), em associação com a Vancomicina frente a E. faecalis e S. aureus e em associação com o Fluconazol frente a C.albicans, C. krusei e C. parapsilosis. Neste estudo foram observadas interações de sinergismo na associação da fração hidroalcoólica de folha e Vancomicina com FICI de 0,3749 frente a E. faecalis e nas associações do Fluconazol com extrato bruto de folha frente a C. krusei e C. parapsilosis, extrato acetônico de folha frente a C. krusei e fração acetato de etila de folha frente a C. albicans, C. krusei e C. parapsilosis com valores de FICI oscilando entre 0,2491 e 04996 ?g/mL. Nas demais combinações testadas foram observadas interações de aditividade e antagonismo. Os extratos e frações de E. pyriformis foram capazes de inibir in vitro o crescimento de bactérias e fungos demonstrando de maneira eficaz sua atividade antimicrobiana, além de apresentar capacidade de exercer ação interferente sobre a atividade antibacteriana e antifúngica dos antimicrobianos, seja através de um efeito antagônico ou sinérgico.Abstract: The Eugenia pyriformis Cambess. species, Myrtaceae, also known by the popular name of uvaia was evaluated regarding the antimicrobial activity of its extracts, fractions and compounds isolated from leaves and stems and their potential synergistic with clinical use of antimicrobial agents. The antimicrobial activity was performed using the bioautography and broth microdilution method for determination the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) against strains of Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Candida abicans ATCC 40175, Candida krusei ATCC 40147 and Candida parapsilosis ATCC 40038. To evaluate the antibacterial activity of the groups tested by the broth microdilution technique it was observed that the fraction of the acetone extract of the stem and leaf, fractions hydroalcoholic and ethyl acetate leaves showed a good inhibitory potential for Gram-positive strains. The analysis of the antifungal activity showed a good inhibitory potential for the crude extracts and acetonic extract with MIC values ranging from 7.81 and 62.5 ?g/mL. The ethyl acetate fraction showed good inhibitory potential only for the leaves, with MICs between 31.25 and 62.5 ?g/mL. The isolated compounds showed to be inactive for the tested microrganisms. The technique of bioautography samples revealed the presence of inhibitory activity in contrast with the results obtained by determination of the MIC. The results obtained by the technique of bioautography show zones of inhibition of growth in all samples of extracts, fractions and compounds isolated from E. pyriformis against strains of Gram-positive tested. For hexane and chloroform fractions of stem and hydroalcoholic fraction of leaves were also observed inhibition zones against C. albicans. These samples showed no antimicrobial activity by the broth microdilution technique for the MICs analyzed. The study of the synergistic potential of E. pyriformis was evaluated by Checkerboard technique for the determination of Fractional Inhibitory Concentration Index, in combination with vancomycin against E. faecalis and S. aureus and in combination with fluconazole against C. albicans, C. krusei and C. parapsilosis. In this study, were observed to interactions synergistically in the combination fraction hydroalcoholic leaves and Vancomycin with FICI of 0.3749 against E. faecalis and associations of Fluconazole with crude extract of leaves against C. krusei and C. parapsilosis, acetone extract of leaves against C. krusei and ethyl acetate fraction leaves against C. albicans, C. krusei and C. parapsilosis, with FICIs between 0,2491 and 04996 ?g/mL. In the other combinations tested were observed additive effect and antagonism. The extracts and fractions of E. pyriformis were able to inhibit in vitro the growth of bacteria and fungi, effectively demonstrating antimicrobial activity, and present ability to exercise interfering action on the antibacterial and antifungal activity of antimicrobial agents, either through a synergistic or antagonistic effects