Caracterização sorologica e molecular de rotavirus de suinos na Regiao Sul do Brasil

Orientador: Yasuyoshi HayashiCo-orientador: Maria Lucia B. O. RaczDissetação (mestrado) - Universidade Federal do ParanaResumo: O objetivo do estudo foi realizar a caracterização sorológica e molecular em amostras de rotavírus suíno na região Sul do Brasil. Para sua realização, foram colhidas 167 amostras de fezes de suínos nas fases de maternidade e creche em 52 granjas de produção de suínos que apresentavam freqüentes casos de diarréia, em 14 municípios dos Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná, durante o período compreendido entre junho de 1995 e outubro de 1997. Todas as amostras foram submetidas a um ensaio imunoenzimático (ELISA) para a detecção de rotavírus do grupo A, das quais 59 (35,33%) foram positivas. Por meio da eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) foi possível revelar a existência de um único eletroferótipo de rotavírus suíno nas regiões estudadas. As amostras positivas foram testadas para a caracterização de subgrupo por meio de um ELISA com anticorpos monoclonais (mAb-ELISA), onde 9 amostras foram específicas para o subgrupo II e 50 não reagiram para nenhum dos subgrupos, sendo classificadas como nãol-nãoll. Para a caracterização de genótipos G e P utilizou-se a técnica de transcrição reversa, seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) com primers específicos para rotavírus de suínos, bovinos e humanos. As amostras foram caracterizadas como genótipos G3, G4, G5, G9, G10 e P[6], P[7] e misturas de P[6] + P[7] no mesmo animal. Este estudo evidenciou a existência de diferentes genótipos de rotavírus suínos, circulando ao mesmo tempo em uma mesma região e ou em uma mesma granja, incluindo o genótipo G9 que, até o último ano tinha sido encontrado somente em amostras humanas.Abstract: The objective of this study was to perform the serological and molecular characterization of swine rotavirus samples in the Southern Brazil region. To carry it out, 167 swine feces samples were gathered from animals in the maternity and nursery phases in 53 swine production farms that presented frequent diarrhea cases, in 14 municipalities of the Rio Grande do Sul, Santa Catarina and Paraná States, during the period between June 1995 and October 1997. All samples were submitted to an enzyme immunosorbent assay (ELISA) for the detection of group A rotavirus, among which 59 (35.33%) were positive. Using polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) it was possible to reveal the existence of a single rotavirus electrophorotype in the studied regions. The positive samples were tested for subgroup characterization employing an ELISA with monoclonal antibodies (mAb- ELISA), in which 9 samples were specific for subgroup II and 50 did not react for any of the subgroups, being classified as nãol-nãoll. The polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for G and P genotype characterization, with primers specific to the swine, bovine and human rotavirus. The samples were characterized as genotypes G3, G4, G5, G9, G10 and P[6], P[7] and mixtures of P[6] + P[7] in the same animal. This study evidenced the existence of different swine rotavirus genotypes, circulating at a same moment in a same region and/or in a same farm, including genotype G9 that, up to last year, had only been found in human samples