Garcinia Gardneriana (Planchon e Triana) Zappi. como alternativa de anti-inflamatório tópico para o tratamento de doenças da pele : um estudo pré-clínico

Orientador : Prof. Dr. Michel Fleith OtukiCo-Orientadora: Profa. Dra. Daniela Almeida CabriniDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 30/09/2009Bibliografia: fls. 61-73Resumo: A Garcinia gardneriana (Cluseacea) é uma planta nativa do interior da Mata Atlântica, facilmente encontrada na beira de rios e córregos. É conhecida popularmente como "bacupari", "bacopari", "bacupari miúdo" ou "mangostão amarelo", sendo utilizada na medicina tradicional para infecções, dor e diversos tipos de inflamação. Em sua composição fitoquímica estão presentes as xantonas, esteróides, triterpenos e biflavonóides, os quais já demonstraram atividade antiinflamatória em estudos prévios. O presente estudo teve por objetivo a avaliação da atividade antiinflamatória tópica do extrato hidroalcóolico da Garcinia gardneriana (EHGG) bem como dos biflavonóides fukugetin e GB-2a sobre processos inflamatórios cutâneos agudos. Para tal, foi realizado modelo de edema de orelha em camundongos (Swiss fêmeas, pesando entre 25 a 30 g) induzido pela aplicação tópica do óleo de cróton, ácido araquidônico (AA), capsaicina ou fenol. Primeiramente, os EHGG das folhas, casca ou sementes foram avaliados no edema de orelha induzido pela aplicação tópica de óleo de cróton. O extrato das folhas foi capaz de reduzir o edema (70 ± 3 % de inibição na dose 0,3 mg/orelha e DI50 0,033 mg/orelha), enquanto os extratos das sementes (51 ± 5 % de inibição) e da casca (60 ± 12 % de inibição) mostraram-se menos efetivos nas doses de 0,1 e 1 mg/orelha, respectivamente. Na avaliação tempo-resposta, o EHGG das folhas (1 mg/orelha) foi significativamente eficaz quando aplicado 2 h antes até 3 h após a indução do edema com óleo de cróton, apresentando maior eficácia quando aplicado junto ao agente flogístico (83 ± 7% de inibição). A infiltração de neutrófilos, avaliada através da atividade da mieloperoxidase (MPO), também foi reduzida pela aplicação tópica do EHGG das folhas em 64±13%, confirmado através de análise histológica. Resultados similares foram observados com fukugetin e GB-2a, os quais foram capazes de reduzir significativamente o edema de orelha do óleo de cróton com DI50 de 0,18 (0,10–0,28) e 0,22 (0,15–0,31) mg/orelha e com inibição de 71 ± 4% e 58 ± 6%, respectivamente, na dose de 0,3 mg/orelha. Além disso, a aplicação tópica do fukugetin (0,1 mg/orelha) e do GB-2a (0,3 mg/orelha) inibiu a atividade da MPO em 52 ± 6% e 64 ± 5%, respectivamente. O EHGG das folhas e os 2 biflavonóides, fukugetin e GB-2a, foram capazes de reduzir consideravelmente a produção de Espécies Reativas de Oxigênio (ERO) na pele causada pela aplicação do óleo de cróton, com inibição de 52 ± 15%, 63 ± 17 e 83 ± 4%, respectivamente. No ensaio de DPPH (2, 2-difenil-1pricrihidrazil), o EHGG e os dois compostos reduziram a formação de radicais livres de modo dependente da concentração. O EHGG das folhas, aplicado topicamente, foi capaz de alterar a formação do edema em outros modelos de inflamação cutânea aguda. O edema de orelha causado pelo AA foi reduzido 57±10% (0,03 mg/orelha) e o causado pelo fenol em 81±6% (1 mg/orelha) pelo tratamento com EHGG. No entanto o extrato não interferiu no edema induzido pela capsaicina. Portanto, o presente trabalho demonstra a eficácia da G. gardneriana, principalmente das folhas, e justifica seu uso popular em processos inflamatórios cutâneos. Além disso, a eficácia antiinflamatória tópica da G. gardneriana pode envolver a redução de mediadores inflamatórios causadores de edema e migração leucocitária e seqüestrando radicais livres, podendo introduzir esta como uma planta de significativo interesse para o desenvolvimento de um novo antiinflamatório tópico.Abstract: The Garcinia gardneriana (Cluseacea) is a native plant from the Atlantic Forest, easily found on the banks of rivers and streams. It is popularly known as "bacupari", "bacopari", "bacupari miúdo" or "mangostão amarelo", being used in traditional medicine for infections, pain and various types of inflammation. Its phytochemical composition show the presence of xanthones, steroids, triterpenes and biflavonoids. In a previous study, the hydroalcoholic extract of G. gardneriana (HEGG) have shown antiinflammatory activity. This study aimed to evaluate the topical anti-inflammatory activity of the HEGG, and of both biflavonoids fukugetin and GB-2a on cutaneous acute inflammation. The ear oedema in mice (Swiss females, 25 to 30 g) was induced by topical application of croton oil, arachidonic acid (AA), capsaicin or phenol. The HEGG from leaves, bark and seeds were evaluated against croton oil ear oedema. Leaves extract was able to reduce the ear oedema (70 ± 3 % inhibition in dose 0,3 mg/ear and ID50 0,033 mg/ear), while seeds (51 ± 5 %) and bark (60 ± 12 %) were less effective. In a time-course evaluation, the leaves extract (1 mg/ear) was significantly effective when mice were treated from 2 h before until 3 h after the croton oil challenge, presenting a maximal inhibition when the extract was applied at the same time as croton oil (83 ± 7%). In addition, the neutrophils infiltration caused by croton oil, evaluated by myeloperoxidase (MPO) activity, also was inhibited in 64 ± 13%, which was confirmed by histological analysis. Similar results were observed with the biflavonoids fukugetin and GB2a, that significantly reduced the ear oedema, with ID50 of 0,18 (0,10–0,28) and 0,22 (0,15–0,31) mg/ear and 71 ± 4% and 58 ± 6% inhibition (0,3 mg/ear), respectively. Application of the fukugetin or GB-2a to the ear caused inhibition of MPO activity, with inhibition of 52 ± 6% (0,1 mg/ear) and 64 ± 5% (0,3 mg/ear), respectively. Besides, the leaves HEGG, and fukugetin and GB2a, were able to considerably reduce the production of reactive oxygen species induced by croton oil in the skin, with 52 ± 15%, 63 ± 17 and 83 ± 4% inhibition, respectively. Again, the HEGG and both compounds showed an in vitro scavenger activity that was concentration-dependent. The topical application of HEGG also resulted in reduction of ear oedema caused by AA with 57 ± 10% inhibition (0,03 mg / ear), and by phenol with 81 ± 6% reduction (1 mg/ear). But the HEGG was unable to interfere with the swelling caused by topical capsaicin. Therefore, the present study show the efficacy of G. gardneriana, specially of leaves, and justified its popular use for skin inflammatory processes. Besides, the topical anti-inflammatory activity of G. gardneriana may involves the reduction of inflammatory mediators and the scavenger of free radicals, suggesting this as a new option for a topical antiinflammatory drug