Isolamento de naftoquinonas e avaliação das atividades antimicrobiana, antioxidante e citotóxica de Sinningia reitzii (Gesneriaceae)

Orientadora: Profª. Drª. Maria Élida Alves StefanelloTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Exatas, Programa de Pós-Graduação em Química. Defesa : Curitiba, 05/04/2019Inclui referências: p.156-168Resumo: Gesneriaceae Rich. & Juss. ex DC. (150 gen/3000 spp) é uma família pantropical, constituída de ervas, cipós ou arbustos. Sinningia Nees (70-80 spp) é neotropical, ocorrendo desde o México até a Argentina. S. reitzii (Hoehne) L.E. Skog é um subarbusto perene, rupícolo, com caule de 20-120 cm, e numerosos tubérculos. É endêmica do Brasil, sendo encontrada na Mata Atlântica e na Floresta Ombrófila dos estados de São Paulo, Paraná e Santa Catarina. Até o inicio deste trabalho não havia nenhum estudo químico ou biológico com essa espécie. O material vegetal seco (tubérculos) foi extraído com solventes de diferentes polaridades (hexano, diclorometano, acetato de etila e etanol), os extratos foram fracionados através de técnicas cromatográficas. As substâncias isoladas foram identificadas empregando-se métodos espectrométricos e espectroscópicos, como espectroscopia no ultravioleta, no infravermelho, espectrometria de massas e ressonância magnética nuclear. Os dados obtidos foram comparados com a literatura. Foram isoladas 13 naftoquinonas preniladas a partir dos extratos em hexano e diclorometano: 8-Hidroxidunniona (SR1), 5-Hidroxi-6,7-dimetoxi- - dunniona (SR2), 7-Hidroxi- -dunniona (SR3), 6,7-Dimetoxidunniona (SR4), 5-Hidroxi-6,7-dimetoxidunniona (SR5), 7-Hidroxi-6-metoxidunniona (SR6), 7-Hidroxidunniona (SR7), 8-Hidroxideiidrodunniona (SR8), 7-Hidroxideiidrodunniona (SR9), 6,8-Diidroxi-7-metoxi-2-O-metildunniol (SR10), 5-Hidroxi-6,7-dimetoxidunniol (SR11), 6-Hidroxi-7,8-dimetoxi-2-O-metildunniol (SR12) e 8-Hidroxi-7-metoxi-2-Ometilstretocarpona (SR13). Destas, SR2, SR4, SR5, SR6, SR8, SR9, SR11, SR12 e SR13 eram inéditas. A atividade antimicrobiana dos extratos foi avaliada contra Staphylococcus aureus ATCC 14458, S. epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 35218, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Candida albicans ATCC 10231, C. glabrata ATCC 30070, C. dubliniensis ATCC 778157 e C. parapsilosis ATCC 22019, pelo método de microdiluição. Todos os extratos foram considerados inativos (CIM > 100 g mL-1). A atividade antioxidante dos extratos foi avaliada pelo método ORAC, e os resultados expressos como mols de trolox equivalente por grama de extrato seco ( mol TE g-1). Todos os extratos foram ativos ( mol TE g-1 > 800). O extrato em EtOH foi o mais ativo (5.814,3 mol TE g-1), seguido do extrato em AcOEt (3.103,7 mol TE g-1). A atividade citotóxica dos extratos foi avaliada contra as linhagens de células tumorais PC-3 (próstata) e SKMEL-103 (melanoma), além da linhagem 3T3 (fibroblastos, não tumoral). Foi utilizado o método MTT e doxorrubicina como controle positivo, sendo os resultados expressos como IC50 em g mL-1. A maior atividade foi observada nos extratos em hexano e diclorometano (IC50 = 0,25-37,24 g mL-1). As substâncias SR1, SR2, SR4 e SR8 também foram avaliadas pelo mesmo método, e utilizando uma linhagem adicional (HeLa - colo do útero). Apenas SR4 foi ativa, mostrando uma forte atividade citotóxica para as linhagens PC-3 e HeLa (IC50 100 ?g mL-1). The antioxidant activity of the extracts was evaluated by the ORAC method, and the results expressed as mols of trolox equivalents per gram of dry extract ( mol TE g-1). All extracts were active ( mol TE g-1 > 800). The extract in EtOH was the most active (5814.3 mol TE g-1), followed by the extract in EtOAc (3103.7 mol TE g-1). The cytotoxic activity of the extracts was evaluated against the PC-3 (prostate) and SKMEL-103 (melanoma) tumor cell lines, as well as the 3T3 (non-tumor fibroblast) lineage, using the MTT method. Doxorubicin was used as positive control, and the results were expressed as IC50 in g mL-1. The extracts in hexane and dichloromethane were the most active (IC50 = 0.25-37.24 g mL-1). Compounds SR1, SR2, SR4 and SR8 were also evaluated by the same method, and using an additional lineage (HeLa - cervix). Only SR4 was active, showing strong cytotoxic activity towards PC-3 and HeLa (IC50 < 10 mols mL-1), without affecting the viability of fibroblast cells (IC50 = 157 mols mL-1). Keywords: Gesneriaceae. Sinningia reitzii. Naphthoquinones. Antimicrobial activity. Antioxidant activity. Cytotoxic activity