Avaliação de atividade leishmanicida in vitro de heteropolissacarídeos ácidos : não sulfatados e naturalmente sulfatados

Orientadora: Dra. Guilhermina Rodrigues NoletoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Defesa: Curitiba, 26/02/2010Bibliografia: fls.71-79Resumo: O tratamento atual para Leishmanioses é feito principalmente com antimoniais pentavalentes há mais de 60 anos. Além de resistência do parasita, estes medicamentos apresentam alta toxicidade. Frente à capacidade de polissacarideos de ativar macrófagos para executar atividade microbicida, o que inclui a atividade leishmanicida, esta foi avaliada in vitro para a arabinogalactana neutra ARAGAL, obtido de Anandethera columbrina, e para polissacarídeos sulfatados obtidos de macroalgas marinhas, Go3 (heteroraminana sulfatada), Iota-Gy (galactana kappa-iota-nu-carragenana) e EHW-I (galactana iota-nu-carragenana). Os compostos Go3, Iota-Gy e EHW-I inibiram a produção de ânion superóxido na ausência e presença de PMA 1 g/mL e apresentaram atividade captadora da mesma espécie reativa de forma dose dependente, chegando, na concentração 10 g/mL a 33% de captação com o Go3, 44% com o Iota-Gy e 55% com o EHW-I. Apresentaram ainda aumento da produção de óxido nítrico alcançando a 10 g/mL aproximadamente 110% de ativação em relação ao controle negativo para Go3, 71% para Iota-Gy e 81% para EHW-I. Houve diminuição da atividade fagocítica para Go3 e EHW-I, Iota Gy não exibiu efeito para esta atividade. A morfologia foi bastante alterada por estes compostos. ARAGAL, Go3, Iota-Gy e EHWI foram então avaliados quanto a atividade leishmanicida em macrófagos peritoneais de camundongos infectados com Leishmania (Leishmania) amazonensis. O polissacarídeo ARAGAL apresentou atividade leishmanicida nas concentrações 10, 25 e 50 g/mL, inibindo 88% do crescimento da Leishmania (Leishmania) amazonensis na concentração mais baixa. O polissacarídeo Go3 apresentou atividade a partir da concentração 5 g/mL chegando a 55% de inibição em 10 g/mL. Iota-Gy iniciou sua atividade já em 2,5 g/mL e atingiu 50% de inibição em 10 g/mL. EHW-I exibiu o efeito leishmanicida mais intenso em todas as concentrações, atingindo 98% de inibição em 10 g/mL. Os resultados obtidos neste trabalho colocam as moléculas testadas em evidência para investigações futuras visando o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos contra leishmanioses.Abstract: The current treatment against Leishmaniasis is mainly done using pentavalent antimonials for over 60 years. Beyond parasits resistance, this medications are highly toxic. Faced with the capacity of olysaccharides activating macrophages to stimulate the microbicidal activity, that includes the leishmanicidal activity, it was evaluated in vitro to the neutral arabinogalactan ARAGAL, obtained from Anandethera columbrina, and to sulfated polysaccharides obtainded from seaweeds, Go3 (sulfated heterorhamnan), Iota-Gy (galactan kappa-iota-nu-carrageenan) and EHW-I (galactan iotanu- carrageenan). The compounds Go3, Iota-Gy and EHW-I inhibited the superoxide anion production in the absence or presence of PMA 1 g/mL and presented a dose dependent scavenging activity to this reactive oxigen species, reaching 33% of scavenging activity to Go3, 44% to Iota-Gy and 55% to EHW-I at the higher concentration, 10 g/mL. They have also increased production of nitric oxide reaching 110% of activation compared to control to Go3, 71% to Iota-Gy and 71% to EHW-I. There was reduction in phagocytic activity for Go3 and EHW-I, Iota-Gy didn't show any effect in this activity. The morphology was considerably changed to these compouds. ARAGAL, Go3, Iota-Gy and EHW-I were than tested for leishmanicidal activity in murine peritoneal macrophages infected with Leishmania (Leishmania) amazonensis. ARAGAL showed leishmanicidal activity at concentrations 10, 25 and 50 g/mL, reaching 88% inhibition of Leishmania (Leishmania) amazonensis growth at the lower concentration. Go3 presented activity at 5 and 10 g/mL up to 55% inhibition. Iota-Gy started its activity in 2.5 g/mL and reached 50% inhibition at 10 g/mL. EHW-I presented the most intense leishmanicidal effect in all concentrations, reaching 98% inhibition at 10 g/mL. The results of this study puts the tested molecules in evidence for future investigations in order to develop new therapeutic agents against leishmaniasis