Características de virulência em estirpes Aeromonas spp

Orientadora : Profª Drª Cyntia Maria Telles Fadel PichethCo-orientadora : Profª Drª Kátia PaludoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 19/12/2011Inclui referênciasÁrea de concentração: Análises clínicasResumoResumo: Bactérias do gênero Aeromonas são capazes de causar uma série de infecções em humanos variando de gastroenterite a septicemia. O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de características associadas com virulência em 100 estirpes de Aeromonas isoladas no Paraná, incluindo 63 estirpes de A. caviae, 13 A. hydrophila, 13 A. veronii sobria, 3 A. trota e 8 Aeromonas spp. A PCR foi utilizada para verificar a presença de genes de virulência associados com atividade hemolítica (aer, aerA e hlyA), atividade de proteases extracelulares (lip e ela), enterotoxinas citotônicas (alt e ast), enterotoxina citotóxica (act), toxinas do tipo Shiga (stx1 e stx2), marcadores dos Sistemas de Secreção Tipo Três (ascV e ascFG) e Tipo Seis (vasH). A capacidade de produzir hemólise foi determinada empregando eritrócitos humanos, e a atividade citotóxica em células HRT18. Noventa e seis por cento das Aeromonas apresentaram pelo menos um dos genes de virulência pesquisados, sendo a prevalência ela 83%, lip 79%, act 21%, aerA 20%, vasH 19%, hlyA, asFG e ast 16%, alt 12%, ascV 7%, aer 3%, stx1 e stx2 0%. Um maior número de genes de virulência foi encontrado nas estirpes de A. hydrophila (4-10), em A. veronii sobria a maioria (77%) das estirpes apresentou 3 a 4 genes, em A.caviae predominaram os isolados com 2 genes, enquanto em A. trota o número de genes de virulência foi de 1 e 2, e em Aeromonas spp 1 a 6. Quatro estirpes não apresentaram nenhum dos genes de virulência pesquisados, entretanto apresentaram atividade hemolítica mostrando a importância dos ensaios celulares na determinação das características de virulência dessas bactérias. A maioria (84%) das bactérias apresentou atividade hemolítica, incluindo 100% de A. hydrophila e A. veronii sobria; e 44% delas apresentou citotoxicidade, com predomínio entre A. veronii sobria (84,6%) e A. hydrophila (76,9%). O elevado número de genes de virulência e as atividades hemolítica e citotóxica, presentes em todas ou na maioria das estirpes destas duas espécies, sugere que as bactérias deste grupo são as que apresentam maior potencial de virulência.Abstract: Aeromonas are capable to cause a number of human infections ranging from gastroenteritis to septicemia. The objective of this study was to verify the presence of characteristics associated with virulence in 100 strains of Aeromonas isolated in Paraná, including 63 strains of A. caviae, 13 A. hydrophila, 13 A. veronii sobria, 3 A. trota and 8 Aeromonas spp. PCR was used to verify the presence of virulence genes associated with hemolytic activity (aer, aerA and hlyA), extracellular protease activity (lip and ela), cytotonic enterotoxins (alt and ast), cytotoxic enterotoxin (act), Shiga toxins (stx1 and stx2), Type Three (ascV and ascFG) and Six (vasH) Secretion Systems markers. The ability to produce hemolysis was determined using human erythrocytes and cytotoxic activity in cells HRT18. Ninety-six percent of Aeromonas had at least one of the virulence genes studied, the prevalence being ela 83%, lip 79%, act 21%, aerA 20%, vasH 19%, hlyA, ascFG and ast 16%, alt 12%, ascV 7%, aer 3%, stx1 and stx2 0%. A greater number of virulence genes was found in strains of A. hydrophila (4-10), in A. veronii sobria the majority (77%) strains showed 3 to 4 genes, in A.caviae predominated isolates with two genes, while in A. trotta the number of virulence genes was 1 and 2, and in Aeromonas spp 1-6. Four strains had no virulence genes, however showed hemolytic activity indicating the importance of cellular assays to determine the virulence characteristics in these bacteria. The majority (84%) of the bacteria showed hemolytic activity, including 100% of A. hydrophila and A. veronii sobria, and 44% of them showed cytotoxicity, with a predominance of A. veronii sobria (84.6%) and A. hydrophila (76.9%). The higher number of virulence genes and hemolytic and cytotoxic activities, present in all or most of the strains of these two species, suggests that bacteria of these groups present the greatest virulence potential