Estudo fitoquímico, antioxidante, antibacteriano, toxicidade e identificação botânica de Ocotea bicolor Vattimo-Gil (Lauraceae)

Orientador : Prof. Dr. Obdúlio Gomes MiguelCoorientadora : Profª. Drª. Marilis Dallarmi MiguelDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 22/02/2017Inclui referências : f. 104-120Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: Ocotea bicolor Vattimo-Gil (LAURACEAE) espécie nativa do Brasil ocorre na região Sul e Sudeste, sendo a Floresta Atlântica seu domínio fitogeográfico. Motivado pela incipiência de estudos sobre a espécie o objetivo deste trabalho foi investigar a composição química, realizar o estudo morfoanatômico, DNA barcode, atividades antioxidante, antimicrobiana e toxicidade da espécie vegetal. O material foi coletado na cidade de Curitiba, Paraná, Brasil. O estudo morfoanatômico foi realizado a partir das folhas e caules e de acordo com metodologia padrão de microscopia ótica e eletrônica. Ocotea bicolor apresentou cutícula lisa, mesofilo dorsiventral e estômatos paracíticos na lâmina foliar. A ausência de tricomas nas estruturas estudadas difere do proposto para Lauraceaes, ao passo que células secretoras foram observadas, indo ao encontro com o descrito para outros gêneros da família. O DNA barcode realizado por metodologia proposta pelo Consortium for the Barcode of Life permitiu o sequenciamento de duas regiões do DNA plastidial (matK e rbcL) as quais foram depositadas no GenBank. Após extração do óleo essencial em aparato de Clevenger modificado foi identificado como compostos majoritários os sesquiterpenos ?-cadineno e ?-sesquifelandreno por técnica cromatográfica. Obteve-se a partir das folhas o extrato bruto cetônico, o qual foi particionado utilizando solventes em escala crescente de polaridade para obtenção das frações hexano, clorofórmio, acetato de etila e remanescente. Qualitativamente foram detectados alcaloides, flavonoides, esteroides, terpenos e cumarinas por meio de cromatografia em camada delgada e identificado o flavonoide astilbina (3-O-?- ramnosídeo de taxifolina) na fração remanescente do sólido por meio de ressonância magnética nuclear. Os ensaios antioxidantes indicaram boa capacidade antioxidante, com destaque da fração hexânica do sólido pelo método de formação do complexo fosfomolibdênio com resultados de 52,33% e 180,41% comparada a vitamina C e rutina respectivamente. No teste de Redução do Radical DPPH a fração remanescente do sólido apresentou o melhor desempenho, com IC50= 8,05 (?g/mL), estatisticamente semelhante aos padrões utilizados. As amostras apresentaram fraco potencial antimicrobiano sobre os organismos testados e bioatividade sobre Artemia salina com destaque para o óleo essencial enquadrado como altamente tóxico aos organismos em questão. Palavras-chave: Morfoanatomia. DNA barcode. Flavonoides. Antioxidante. Toxicidade.Abstract: Ocotea bicolor Vattimo-Gil (LAURACEAE) is a species native of Brazil that occurs in the South and south-west regions, being the Atlantic Forest its phytogeographic domain. Motivated by the incipience of studies on the species the aim of the present study was to evaluate the chemical composition, to conduct the morphoanatomic study, DNA barcode, antioxidante and antimicrobial activities and toxicity of this plant. The plant material was collected in Curitiba city, state of Paraná, Brazil. Morphological studies were carried out on leaves and stems using the standard methodology of optical and electronic microscopy. Ocotea bicolor showed smooth cuticle, dorsiventral mesophyll and paracytic stomata on blade leaf. The absence of trichomes in studied structures differs from that proposed for Lauraceaes, whereas secretory cells were observed, in accordance with other family genera. The DNA barcode performed by the methodology proposed by Consortium for the Barcode of Life, allowed the sequencing of two regions of plastid DNA (matK and rbcL) which were deposited in GenBank. After the essential oil extraction in modified Clevenger apparatus, sesquiterpenes ?-cadinene and ?-sesquifelandreno were identified as major compounds by chromatographic technique. The ketone crude extract was obtained from the leaves, which was partitioned in solvents of increasing polarity to obtain the hexane, chloroform, ethyl acetate and remaining fractions. Qualitatively, alkaloids, flavonoids, steroids, terpenes and coumarins were detected by thin layer chromatography and the flavonoid astilbin (3-O-?-ramnosil-taxifolin) were identified in the remaining fraction of the solid by nuclear magnetic resonance. The antioxidant capacity results obtained were good, with emphasis on hexane fraction of the solid by the antioxidant capacity through the formation of a phosphomolybdenum complex, with results of 52.33% and 180.41%, respectively, compared to vitamin C and rutin. The remaining fraction of the solid in Antioxidant Activity by DPPH Radical Scavenging Method, showed the best performance, with IC50 = 8.05 (?g / mL), statistically similar to the standards used. The samples presented no significant antimicrobial potential on the organisms tested and low bioactivity on Artemia salina with emphasis on the essential oil framed as highly toxic to the organisms in question. Keywords: Morphoanatomy. DNA barcode. Flavonoids. Antioxidant. Toxicity