Estudo das combinações KIR2DL4 e ligante HLA-G em pacientes com indicação de transplante de células-tronco hematopoieticas : leucemia mieloide aguda vs leucemia linfoide aguda

Orientadora : Profª. Drª. Maria da Graça BicalhoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biologicas. Defesa: Curitiba, 28/06/2013Inclui referênciasÁrea de concentração : GenéticaResumo: A leucemia mieloide aguda (LMA) é um grupo heterogéneo de doenças clonais do tecido hematopoietico, que é caracterizada pela proliferação anormal de células progenitoras da linhagem mieloide, resultando na produção insuficiente de células sanguíneas maduras normais, com a consequente substituição de tecido normal. A leucemia linfoide aguda (LLA), um outro grupo heterogêneo de doenças clonais de tecido hematopoietico, é um câncer das células brancas do sangue, caracterizada pela proliferação anormal de células progenitoras linfoides. Observações clínicas após o transplante de células-tronco hematopoéticas (CTH) em pacientes com LMA sugerem que a alorreatividae das células Natural Killer (NK) do doador, cujos principais alvos são as células hematopoieticas do paciente, resulta em um efeito enxerto versus leucemia (GvL) e uma menor incidência da doença do enxerto versus hospedeiro (DECH). A alorreatividae das células NK foi definida pela ausência no paciente do ligante do Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC) de classe I para inibir o Killer-cell Immunoglobulin-like Receptor (KIR) presente nas células NK do doador. O antígeno leucocitário humano "G" (HLA-G) foi avaliado como um importante modulador da tolerância imunológica, como um resultado da interação com o receptor KIR2DL4. O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil KIR2DL4 e seu ligante HLA-G em pacientes com LMA, LLA e suas famílias nucleares para analisar possíveis diferenças na variação alélica ou genotípica entre esses três grupos e contribuir para a compreensão dos mecanismos de alorreatividae mediada pelas células NK associadas ao efeito GvL. Os genes HLA-G e KIR2DL4 foram genotipados por sequenciamento direto do DNA. Alelos HLA-G foram definidos por variações na sequência de nucleotídeos nos exons 2, 3 e 4. Alelos KIR2DL4 foram definidos por variações na sequência de nucleotídeos nos exons 3, 5, 7, 8 e 9. Os resultados sugerem que a frequência da associação alélica HLA-G*01:01:02 KIR2DL4*00102 pode ser maior no grupo de pacientes com LMA em relação ao grupo de pacientes com LLA e do grupo de não- pacientes. Palavras-chave: HLA-G, KIR2DL4, leucemia, leucemia mieloide aguda, leucemia linfoide aguda, efeito GvL.Abstract: The acute myeloid leukemia (AML) is an heterogeneous group of clonal diseases of hematopoietic tissue, which is characterized by abnormal proliferation of myeloid lineage progenitor cells, resulting in insufficient production of normal mature blood cells, with consequent replacement of normal tissue. Acute lymphoblastic leukemia (ALL), another heterogeneous group of clonal diseases of hematopoietic tissue, is a cancer of white blood cells characterized by abnormal proliferation of lymphoblastic progenitor cells. Clinical observations after transplantation of Hematopoietic Stem Cells (HSC) in patients with AML suggest that the alloreactivity of donor Natural Killer cells (NK), whose primary targets are the patient's hematopoietic cells, results in a Graft versus Leukemia effect (GvL) and a lower incidence of Graft versus Host Disease (GvHD). The alloreactivity of NK cells has been defined by the absence of the Class I Major Histocompatibility Complex (MHC) ligand in the patient for inhibitory Killercell Immunoglobulin-like Receptor (KIR) present in the donor NK cells. The Human Leukocyte Antigen "G" (HLA-G) has been reported as an important modulator of immune tolerance as a result of interactions with KIR2DL4 receptor. The objective of this work was to evaluate the KIR2DL4 profile and its ligand HLA-G in patients with AML, ALL and their nuclear families to analyze possible differences in allelic or genotypic variation between these three groups and contribute to the understanding of mechanisms of alloreactivity mediated by NK cells associated to the GvL effect. The HLA-G and KIR2DL4 genes were genotyped by direct DNA sequencing. HLA-G alleles were defined by nucleotide sequence variations at exons 2, 3 and 4. KIR2DL4 alleles were defined by nucleotide sequence variations at exons 3, 5, 7, 8 and 9. The results suggest that the frequency of the allelic association HLAG*01:01:02 KIR2DL4*00102 is increased in the group of patients with AML in relation to the group of patients with ALL and the non-patients group. Keywords: HLA-G, KIR2DL4, leukemia, acute myeloid leukemia, acute lymphoblastic leukemia, GvL effect