Efeitos induzidos pelas toxinas presentes no veneno de Loxosceles Intermedia (aranha marrom) em células endotelias em cultura

Orientadora: Célia Regina Cavichiolo FrancoCoorientador: Edvaldo da Silva TrindadePáginas 43 e 49 sem numeração.Monografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : Acidentes envolvendo aranhas do gênero Loxosceles spp (aranhas marrons) são considerados de grande importância médica, constituindo um problema de saúde pública, principalmente no Estado do Paraná. O quadro clínico que caracteriza o loxoscelismo é a lesão dermonecrótica no local da picada, podendo evoluir para efeitos sistêmicos, incluindo hemorragia, hemólise, agregação plaquetária e insuficiência renal aguda (IRA). O estudo das conseqüências hemorrágicas induzidas pelas toxinas do veneno de Loxosceles intermédia tem demonstrado que células endoteliais em cultura expostas a esse, apresentam profundas alterações morfológicas com perda da adesividade da célula ao substrato. Além disso, foi demonstrado a ligação do veneno sobre a célula e uma ação sobre a matriz extracelular através da degradação da fibronectina produzida pela mesmo. Este trabalho, com o emprego das mesmas -linhagens endoteliais, buscou ampliar o conhecimento acerca do mecanismo molecular de ação das toxinas presentes no veneno. Com o emprego de Lectina (WGA) observou-se que as toxinas do veneno interagem especificamente com a superfície celular, tendo uma co-localização com os carboidratos de superfície celular, sendo o veneno capaz de reduzir sua expressão em quatro horas de exposição. As toxinas do veneno também interagem com receptores integrínicos de superfície celular (subunidade J3i), e em especial o receptor de fibronectina, a integrina as(3i. Sobre a interação do veneno com os componentes da superfície celular, pode-se inferir sobre uma especificidade independente de cargas, uma vez que glicosaminoglicano de Heparina é capaz de interagir com as toxinas do veneno, todavia, não desloca a ligação do veneno com a superfície celular. Verificou-se, ainda, que o veneno é capaz de reduzir a proliferação das células expostas ao veneno por 24 ou 48 horas. Através de Microscopia Eletrônica de Transmissão, observou-se que essas células, após esses longos períodos de exposição apresentam inúmeros sinais de sofrimento celular, muitos indicando a morte da célula, principalmente em 48 horas. Além disso, essas células apresentaram um aumento expressivo de vesículas e vacuólos no citoplasma e pela técnica de laranja de ãcridina supõem-se que estes são compartimentos endossomais (ácidos). E através de imunomarcação do veneno e sua co-localização com lisossomas pode-se inferir que a marcação típica observada para as toxinas do veneno sobre as células endoteliais, não se refere à apenas uma marcação na superfície celular, mas a uma marcação intracelular do veneno. Com base nesse resultado sugere-se que alguma(s) das toxinas que compõe o veneno podem estar sendo internalizadas pela célula endotelial. Tais resultados sugerem que a ação deletéria do veneno sobre células endoteliais pode estar relacionada tanto com sua interação com moléculas da superfície celular, quanto com sua internalização