Proapoptotic and Antimigratory Effects of Pseudevernia furfuracea and Platismatia glauca on Colon Cancer Cell Lines

Svrha je ovoga rada bila ispitati citotoksični, proapoptotski, antimigratorni i pro-antioksidacijski učinak metanolnih, acetonskih i etil-acetatnih ekstrakata dvaju vrsta lišaja, i to: Pseudevernia furfuracea i Platismatia glauca na tumorske stanične linije debelog crijeva (HCT-116 i SW-480). Citotoksični efekti na tumorskim staničnim linijama debelog crijeva uspoređeni su s onima na staničnoj liniji normalnih humanih fibroblasta (MRC-5). Citotoksičnost je ispitana MTT testom, stanična migracija Transwell esejom, dok je apoptoza praćena fluorescentnom metodom pomoću akridin narančastog bojila i etidijevog bromida. Prooksidacijski/antioksidacijski učinak praćen je spektrofotometrijskim mjerenjem koncentracije redoks parametara. Ispitani ekstrakti imali su značajan citotoksični učinak na tumorske stanične linije, bez zapaženog utjecaja na normalnu staničnu liniju. Najjača citotoksičnost postignuta je nakon 72 h obrade staničnih linija ekstraktima vrste P. furfuracea (IC50= (21,2±1.3) µg/mL pri obradi HCT-116 stanica etil-acetatnim ekstraktom i IC50=(51.3±0.8) µg/mL pri obradi stanica SW-480 acetonskim ekstraktom). Ekstrakti P. furfuracea imali su značajan proapoptotski i prooksidacijski učinak, dok je metanolni ekstrakt te vrste imao najjači antimigratorni učinak na ispitane tumorske stanične linije. Svi ispitani ekstrakti vrste P. glauca imali su znatan citotoksični učinak na stanice HCT-116 nakon 72 h tretmana (IC50<40 μg/mL), dok su metanolni i acetonski ekstrakti imali citotoksični učinak na stanice SW-480 nakon 24 h, s izraženom proapoptotskom/nekrotskom aktivnošću. Svi navedeni efekti posljedica su induciranog oksidacijskog stresa u tretiranim stanicama. Može se zaključiti da ekstrakti lišaja bitno mijenjaju vijabilnost i migratorni potencijal ispitanih tumorskih staničnih linija karcinoma debelog crijeva. Dobiveni rezultati pokazuju da su stanice HCT-116 osetljivije na ispitane ekstrakte, pri čemu ekstrakti vrste P. furfuracea pokazuju bolji proapototski i antimigratorni učinak. Ispitane vrste lišaja mogu se smatrati izvorima antikancerogenih aktivnih tvari.The aim of this study is to investigate cytotoxic, proapoptotic, antimigratory and pro-antioxidant effects of methanol, acetone and ethyl acetate extracts of lichens Pseudevernia furfuracea and Platismatia glauca on colorectal cancer (HCT-116 and SW-480) cell lines. We compared the cytotoxic effects on colorectal cancer cells with the effects obtained from normal human fibroblast (MRC-5) cell line. Tetrazolium (MTT) test evaluated the cytotoxic effects, Transwell assay evaluated cell migration, acridine orange/ethidium bromide (AO/EB) fluorescent method followed the apoptosis, while prooxidant/antioxidant effects were determined spectrophotometrically through concentration of redox parameters. The tested extracts showed considerable cytotoxic effect on cancer cells with no observable cytotoxic effect on normal cells. Ethyl acetate and acetone extract of P. furfuracea induced the highest cytotoxicity (IC50=(21.2±1.3) μg/mL on HCT-116, and IC50=(51.3±0.8) μg/mL on SW-480 cells, respectively, after 72 h), with noteworthy apoptotic and prooxidant effects, and antimigratory potential of methanol extract. P. glauca extracts induced cytotoxic effects on HCT-116 cells after 72 h (IC50