Untersuchungen zur Interaktion von humanem Ras und Rap mit regulatorischen Proteinen

Die vorliegende Dissertation zeigt die Verwendung von kovalent und ortsspezifisch gekoppelten Fluoreszenzsonden an Ras und Rap zur Analyse der Interaktion mit Bindungspartnern. Die fluoreszenten Protein-Varianten wurden auf Signalgebung für die Bindung an Interaktionspartner getestet und die Bindung detailliert charakterisiert. Epac1 ist ein durch cAMP regulierter Guaninnukleotid-Austauschfaktor für die kleine Ras-ähnliche GTPase Rap1. Die Bindung von cAMP und fluoreszenten cAMP-Analoga an die cAMP-Bindungsdomäne wurde mittels Fluoreszenzspektroskopie untersucht. Die Untersuchung der Aktivierung von Epac zeigt, daß Bindung zyklischer Nukleotide und Aktivierung der GEF-Aktivität voneinander entkoppelt werden können. Dies ist die Grundlage zur gezielten Entwicklung spezifischer Inhibitoren (und auch Aktivatoren) von Epac