Charakterisierung der ADP-Ribosyltransferasen ModA, ModB und Alt des Bakteriophagen T4

Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit der molekularbiologischen und biochemischen Charakterisierung der drei ADP-Ribosyltransferasen Alt, ModA und ModB des Bakteriophagen T4. Die identifizierten Zielproteine dieser Transferasen, zu denen unter anderen ribosomale Proteine, EF-TU und der Trigger Faktor gehören, weisen insgesamt auf einen erheblichen Einfluss des Bakteriophagen auf die Translations- und Proteinfaltungsmaschinerie seines Wirtes hin. Aufgrund von Inhibitorstudien ließen sich ModA und ModB als argininspezifische Mono-ADP-Ribosyltransferasen charakterisieren. Ein Alignment dieser beiden Enzyme mit anderen ADP-Ribosyltransferasen ermöglichte die Vorhersage katalytisch essentieller Aminosäuren, die im Rahmen von ortsspezifischen Mutagenese-Experimenten verifiziert werden konnten. Dazu gehören ein essentielles an der Bindung des NAD+ beteiligtes Arginin (R72 in ModA und R73 in ModB) sowie die in ADP-Ribosyltransferasen konservierten Motive Glx-X-Glu und Phe-Asn-Phe/Tyr