Transienter adenoviraler Gentransfer kutaner Epithelzellen

Primäre Keratinozyten und Fibroblasten, sowie die HEK- 293 und HaCat- Zelllinien wurden in MOIs von 0,1, 1, 10 und 100 transfiziert. Die Transduktionseffizienz und Zythopathogenität wurden 12, 24 und 48 Stunden, sowie 3, 10, 20 und 30 Tage nach Transfektion ermittelt. Die GFP- Expression wurde im Fluorimeter und Durchflusszytometer quantifiziert, die Zytotoxizität mit der Trypan- Blau- Methode. Die Ergebnisse zeigten eine Zeit und Dosis- abhängige Expression von GFP bei allen Zelltypen. Im Durchflusszytometer lagen die maximalen Tranfektionsraten nach 48 Stunden und einer MOI von 100 bei 79% für HKC, 70% für HFB und bei 48% für die Zelllinie. Das Reportergen GFP wurde stabil 30 Tage in vitro exprimiert. Das zytopathogene Potential des Adenovirus war gering. Die Ergebnisse zeigten eine effektiven und nicht toxischen viralen Gentransfers in Hautzellen in vitro. Sie sind potentiell bedeutsam für ex vivo Studiendesigns als auch als Referenzpunkt für eine Anwendung in vivo