Monolitická kapilární kolona s integrovaným elektrochemickým detektorem

The carbon fiber and silver microwire were used as working and pseudoreference electrode, respectively, and inserted into the ending of capillary to prepare monolithic capillary column with an integrated electrochemical detector. Prepared capillary devices offered stable and robust results with relative standard deviations of retention, resolution, and detection signal lower than 1.5, 5.5, and 5.0%, respectively. To further increase sensitivity of developed electrochemical microdetector, multiple pulse amperometry detection mode has been used. Optimized integrated device provided reliable chromatographic separation of mixture of neurotransmitters with calibration curve for dopamine linear from 0.5 to 20.0 mg L-1 and an instrumental limit of detection as low as 24 pg of injected dopamine. Finally, developed capillary column was applied to successful determination of dopamine in a human urine. By using both calibration curve and standard addition method, the dopamine level was determined to be 0.74 +/- 0.03 mgL(-1) and 0.71 +/- 0.02 mgL(-1), respectively. Triplicates of dopamine analysis provided relative standard deviations lower than 2.7% for intraday analyses, while interday relative standard deviations were lower than 3.6% for five consecutive days.Uhlíkové vlákno a stříbrný mikrodrát byly použity jako pracovní a pseudoreferentní elektroda a vloženy do konce kapiláry k přípravě monolitické kapilární kolony s integrovaným elektrochemickým detektorem. Připravené kapilární zařízení poskytovala stabilní a robustní výsledky s relativními standardními odchylkami retence 1,5 %, rozlišení 5,5 % a detekovaného signálu 5 %. K dalšímu zvýšení citlivosti vyvinutého elektrochemického mikrodetektoru byla použit detekční mód v režimu multipulzní amperometrie. Optimalizované integrované zařízení poskytlo spolehlivou chromatografickou separaci směsi neurotransmiterů s kalibrační odezvou lineární v rozmezí 0,5 až 20,0 mg l-1 a instrumentálním detekčním limitem až 24 pg nadávkovaného dopaminu. Kapilární kolona byla použita k úspěšnému stanovení dopaminu v lidské moči. Pomocí kalibrační křivky byla určena koncentrace dopaminu 0,74 +/- 0,03 mg l-1, metodou standardního přídavku pak 0,71 +/- 0,02 mg l-1. Relativní standardní odchylka tří opakovaných analýz dopaminu v rámci jednoho dne byla nižší než 2,7 %, opakované analýzy během pěti po sobě jdoucích dnů pak měly relativní směrodatnou odchylku nižší než 3,6 %