Wirkung eines TNFR2-spezifischen Agonisten auf chronische Entzündung

Ziel dieser Arbeit war die Untersuchung der Effekte einer Behandlung mit dem TNFR2 (Tumornekrosefaktor-Rezeptor 2)-selektiven Agonisten TNF80 in unterschiedlichen Entzündungszuständen. Zur Induktion einer chronischen Entzündung diente das BCG (Bacille Calmette-Guérin)-Mausmodell von Sade-Feldman et al. (Sade-Feldman et al. 2013). Um eine akute Entzündungsreaktion auszulösen, verabreichten wir BCG bzw. LPS (Lipopolysaccharid) einmalig als Challenge. Als Messgrößen dienten Gewicht, Zellzahl und Zellverteilung in der Milz bzw. im Knochenmark, die in vitro-T-Zell-Suppressivität sowie die Konzentration verschiedener Zytokine in Serum und Zellkulturüberständen . Die wiederholte Injektion von BCG führte zu einer Notfallmyelopoese mit Expansion myeloider Zellen im Knochenmark und in der Milz. Gleichzeitig kam es zu einer Reduktion der B- und T-Zellen. Diese Entzündungsreaktion war weitestgehend unabhängig von der TNFR2-Expression der einzelnen Zellen. Ob die Verminderung der Lymphozyten auf Verdrängung, direkter Suppression durch MDSCs (myeloide Suppressorzellen) oder Migration in die Peripherie beruht, könnte Gegenstand weiterer Studien sein. Eine zweimalige Behandlung naiver Mäuse mit TNF80 führte ähnlich einer alleinigen BCG-Challenge zu einer akuten Entzündungsreaktion mit Zunahme von Milzgewicht und -zellzahl. Diese Behandlung führte zu einer Toleranz gegenüber weiteren Entzündungsstimuli durch eine BCG-Challenge. Im chronischen Entzündungsmodell führte die TNF80-Behandlung zu einer relativen Expansion der Treg-Fraktion, ohne Einfluss auf Milzgewicht und -zellzahl zu nehmen. Da in einer anderen Studie mehrfache Applikationen von TNF80 nötig waren, um Treg zu vermehren (Schmid et al. 2017), ist anzunehmen, dass die entzündliche Umgebung die Treg empfänglicher gegenüber einer TNFR2-Aktivierung macht. Wir zeigten außerdem, dass eine ein- oder zweimalige Behandlung mit TNF80 in akut oder chronisch entzündeten Mäusen zu einer Reduktion der Serum-TNF-Spiegel führt. Diese Toleranz gegenüber einem akuten Entzündungsstimulus, in diesem Fall gegenüber einer LPS-Injektion, bezeichneten wir als TNF80-Toleranz. Gleichzeitig kam es durch die Behandlung zu einer Reduktion des immunsuppressiven IL-10 (Interleukin 10) im Serum. Ob IL-10 dennoch an der Toleranzentwicklung beteiligt ist, ließe sich beispielsweise durch die zusätzliche Applikation von anti-IL-10 mAb untersuchen. Die in vitro-Suppressivität der Treg wurde im chronischen Entzündungsmodell durch eine einmalige Behandlung mit TNF80 gesteigert. Eine zweimalige Behandlung führte zwar zur Expansion von Treg, diese zeigten sich jedoch weniger suppressiv als die nicht behandelter Mäuse. Die im Vergleich zu naiven Mäusen erhöhten IFN-ɣ (Interferon ɣ)-Konzentrationen in den Überständen der Treg chronisch entzündeter Mäuse konnten auch durch die einmalige TNF80-Behandlung nicht gesenkt werden. Allerdings führte die einmalige Behandlung hier zu einer deutlichen Steigerung der IL-10-Produktion im Überstand. Die in vivo- Ergebnisse der Durchflusszytometrie und der Zytokinbestimmung in Serum steht teilweise im Widerspruch mit den in vitro-Ergebnissen. Um eine genauere Aussage bezüglich der Wirkung von TNF80 auf die Treg-Suppressivität sowie die Zytokinspiegel im Serum treffen zu können, wäre eine Untersuchung im in vivo-Suppressionsassay sinnvoll. Zusammenfassend stellt die Behandlung von Pathologien mit chronischer Entzündung durch TNF80 einen interessanten Ansatz dar. Aufgrund der komplexen Wirkung in Abhängigkeit von der Applikationsfrequenz sowie des Entzündungszustandes sind jedoch ausführliche weitere Studien notwendig, um die Effekte einer Behandlung ausreichend abschätzen zu können