DNA-RNA IN HUMAN SERUM: A NEW METHOD FOR QUANTITATION AND ELECTROPHORETIC SEPARATION OF DNA

THIS INVESTIGATION DEALS WITH THE QUALITATIVE AND QUANTITATIVE ANALYSIS OF DNAIN HUMAN BLOOD SERUM. THE QUANTITATIVE METHOD BRIEFLY IS AS FOLLOWS: (1) INCUBATION OF SERUM WITH RNASE AND DIALYSIS FOR PURIFICATION. (2) INCUBATION WITH DNASE AND SIMULTANEOUS DIALYSIS V.S. A SMALL QUANTITY OF "COLLECTION" BUFFER.(3) ABSORBANCE MEASUREMENT AND CALCULATION OF DNA CONCENTRATION USING THE EQUATION (FORMULA). THE ELECTROPHORETIC SEPARATION IS AS FOLLOWS: INCUBATION WITH RNASE, DEPROTEINIZATION WITH PROTEINASE K AND PHENOL, CONCENTRATION, ELECTROPHORESIS IN THE PRESENCE OF SDS AND STAINING OF THE GEL. HIGHER DNA CONCENTRATIONS AND SMALL MOLECULAR WEIGHT DNA BANDS WERE ESTIMATED IN THE SERUM OF CANCER PATIENTS AS COMPARED TO THE SERUM OF NORMALS. THE METHOD COULD BE POTENTIALLY USEFUL AS A DIAGNOSTIC TEST FOR MALIGNANCIES.ΣΤΗΝ ΕΡΓΑΣΙΑ ΑΥΤΗ ΠΕΡΙΓΡΑΦΕΤΑΙ ΜΙΑ ΝΕΑ ΜΕΘΟΔΟΣ ΠΟΥ ΑΝΑΠΤΥΧΘΗΚΕ ΤΟΣΟ ΓΙΑ ΤΟΝ ΠΟΣΟΤΙΚΟ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟ ΤΟΥ DNA ΟΣΟ ΚΑΙ ΓΙΑ ΤΟΝ ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΤΙΚΟ ΤΟΥ ΔΙΑΧΩΡΙΣΜΟ ΣΤΟΝΟΡΟ ΑΙΜΑΤΟΣ ΥΓΙΩΝ ΚΑΙ ΚΑΡΚΙΝΟΠΑΘΩΝ ΑΤΟΜΩΝ. Ο ΠΟΣΟΤΙΚΟΣ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΕΙ ΤΑ ΣΤΑΔΙΑ: (1) ΕΠΩΑΣΗ ΤΟΥ ΟΡΟΥ ΜΕ RNΑΣΗ ΚΑΙ ΔΥΟ ΔΙΑΠΙΔΥΣΕΙΣ "ΚΑΘΑΡΙΣΜΟΥ". (2) ΕΠΩΑΣΗ ΤΟΥ ΟΡΟΥ ΜΕ DNΑΣΗ ΚΑΙ ΤΑΥΤΟΧΡΟΝΗ ΔΙΑΠΙΔΥΣΗ ΓΙΑ ΤΗ ΣΥΛΛΟΓΗ ΤΩΝ ΠΡΟΙΟΝΤΩΝ ΔΙΑΣΠΑΣΗΣ ΤΟΥ DNA ΣΕ ΜΙΚΡΟ ΟΓΚΟ ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΟΥ ΔΙΑΛΥΜΑΤΟΣ. (3) ΦΩΤΟΜΕΤΡΗΣΗΣΤΟ ΥΠΕΡΙΩΔΕΣ ΚΑΙ ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΣΥΓΚΕΝΤΡΩΣΗΣ ΜΕ ΤΗΝ ΕΞΙΣΩΣΗ (ΤΥΠΟΣ). Ο ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΧΩΡΙΣΜΟΣ ΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΕΙ ΤΗΝ ΑΠΟΠΡΩΤΕΙΝΩΣΗ ΤΟΥ ΟΡΟΥ ΜΕ ΠΡΩΤΕΙΝΑΣΗ Κ ΚΑΙ ΜΕ ΦΑΙΝΟΛΗ, ΤΗ ΣΥΜΠΥΚΝΩΣΗ, ΤΗΝ ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΣΗ ΠΑΡΟΥΣΙΑ SDS ΚΑΙ ΧΡΩΣΗ ΓΙΑ ΤΟΝ ΕΝΤΟΠΙΣΜΟ ΚΛΑΣΜΑΤΩΝ DNA. ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΘΗΚΑΝ ΥΨΗΛΟΤΕΡΕΣ ΣΥΓΚΕΝΤΡΩΣΕΙΣ ΚΑΙ ΑΝΙΧΝΕΥΘΗΚΑΝ ΚΛΑΣΜΑΤΑ DNA ΣΤΟΝ ΟΡΟ ΤΩΝ ΚΑΡΚΙΝΟΠΑΘΩΝ ΣΕ ΣΧΕΣΗ ΜΕ ΤΟΥΣ ΥΓΙΕΙΣ. Η ΜΕΘΟΔΟΣ ΕΠΙΤΡΕΠΕΙ ΤΗΝ ΤΑΥΤΟΧΡΟΝΗ ΠΑΡΑΚΟΛΟΥΘΗΣΗ ΜΕΓΑΛΟΥ ΑΡΙΘΜΟΥ ΑΤΟΜΩΝ ΥΨΗΛΟΥ ΚΙΝΔΥΝΟΥ ΕΜΦΑΝΙΣΗΣ ΝΕΟΠΛΑΣΙΩΝ